アドレノメデュリンの生理的・臨床的意義に関する発生学的・分子医学的研究

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10218204
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 中尾 一和 京都大学, 医学研究科, 教授 (00172263)
• 研究分担者: 小川 佳宏 京都大学, 医学研究科, 助手 (70291424) ; 向山 将志 京都大学, 医学研究科, 講師 (40270558) ; 伊藤 裕 京都大学, 医学研究科, 助教授 (40252457)
• キーワード: アドレノメデュリン / アドレノメデュリン受容体 / RAMP / 血管発生 / 血管障害 / 内皮再生 / 腎障害 / 線維化

研究概要

1.血管障害・血管リモデリングにおけるAMの意義の検討
我々は培養ウシ血管内皮細胞を用いて、shear stressに加え酸化ストレスが内皮からのAMの産生分泌亢進に働くとともに、エンドセリン分泌を抑制することを見出し、この際内因性のAMがautocrine調節因子として内皮保護に働くことを示した。一方、静止状態でのHUVECに対してAM添加はむしろ増殖亢進を示した。また、in vitroでのcell migration assay、wound healing assayにより、AMは内皮細胞の遊走促進とともに、VEGFと同程度の強力な内皮再生活性を有することが示され、この作用はcAMP/PKA系およびPI3K系を介することが明らかとなった(Hypertens Res2003)。さらに、gel plug assay、laser Doppler imagingを用いて、AMはin vivoにおいても血管再生を促進することを示した。
2.血管発生・再生分化におけるAMおよび受容体の意義の検討
我々は既に、マウスES細胞より内皮細胞および血管平滑筋細胞の双方に分化しうる新規血管前駆細胞(VPC)の同定に成功した。さらに、生体に移植すると、ES細胞由来VPCがadultでの血管新生にも寄与しうることを明らかにした(Blood 2003)。このin vitro血管発生モデルを用いてAM受容体コンポーネントの発現を解析し、初期段階よりRAMP2/CRLRの発現を認め、AMが血管発生に意義を有する可能性を示唆した。現在in vivo血管発生・再生モデルにおいて、AMの意義の検討を進めている。
3.腎障害におけるAMおよび受容体の意義の検討
我々は既に、腎障害モデルにおけるAM受容体コンポーネントの発現について検討し、腎間質線維化モデルにおけるRAMP2/CRLRの著明な発現亢進を見出した。この際腎組織内に増加したcAMPはAM中和抗体で基礎値程度まで抑制され、内因性AM/AM受容体系の関与が示された。さらに、腎間質線維芽細胞にてAM添加は増殖抑制と抗線維化作用を示し、AM系が腎保護的に作用する可能性を示した。

研究成果

• [文献書誌] K.Miyashita: "Adrenomedullin promotes proliferation and migration of cultured endothelial cells"Hypertension Research. 26(Suppl). S93-S98 (2003)
• [文献書誌] K.Yamahara: "Significance and therapeutic potential of the natriuretic peptides/cGMP/cGMP-dependent protein kinase pathway in vascular regeneration"Proceedings of National Academy of Sciences in USA. 100(6). 3404-3409 (2003)
• [文献書誌] T.Yurugi-Kobayashi: "Effective contribution of transplanted vascular progenitor cells derived from embryonic stem cells to adult neovascularization in proper differentiation stage"Blood. 101(7). 2675-2678 (2003)
• [文献書誌] H.Kook: "Physiological concentration of atrial natriuretic peptide induces endothelial regeneration in vitro"American Journal of Physiology. 284(4). H1388-H1397 (2003)
• [文献書誌] K.Masatsugu: "Shear stress attenuates endothelin and endothelin-converting enzyme expression through oxidative stress"Regulatory Peptides. 111(1-3). 13-19 (2003)
• [文献書誌] K.Sawai: "Angiogenic protein Cyr61 is expressed by podocytes in anti-Thy-1 glomerulonephritis"Journal of the American Society of Nephrology. 14(発表予定). (2003)
• [文献書誌] N.Ohno: "Accelerated reendothelialization with suppressed thrombogenic property and neointimal hyperplasia of rabbit jugular vein grafts by adenovirus-mediated gene transfer of C-type natriuretic peptide"Circulation. 105(14). 1623-1626 (2002)
• [文献書誌] H.Yokoi: "Role of connective tissue growth factor in fibronectin expression and tubulointerstitial fibrosis"American Journal of Physiology. 282(5). F933-F942 (2002)
• [文献書誌] Y.Li: "Guanylyl cyclase-A inhibits angiotensin II type 1A receptor-mediated cardiac remodeling, an endogenous protective mechanism in the heart"Circulation. 106(13). 1722-1728 (2002)
• [文献書誌] H.Makino: "Prevention of diabetic nephropathy in rats by prostaglandin E receptor EP_1-selective antagonist"Journal of the American Society of Nephrology. 13(7). 1757-1765 (2002)
• [文献書誌] A.Yoshimoto: "Plasma ghrelin and desacyl ghrelin concentrations in renal failure"Journal of the American Society of Nephrology. 13(11). 2748-2752 (2002)