T細胞の分化と機能を制御するシグナル伝達系の解析

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10307008
• 研究種目: 基盤研究(A)
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 斉藤 隆 千葉大学, 大学院・医学研究科, 教授 (50205655)
• 研究分担者: 荒瀬 尚 千葉大学, 大学院・医学研究科, 助手 (10261900) ; 大野 博司 千葉大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (50233226)
• キーワード: T細胞抗原レセプター / Co-stimulation / CD3結合分子 / Jakキナーゼ / 胸腺細胞選択 / CTLA-4 / シグナル伝達系 / 活性化制御

研究概要

T細胞抗原レセプター(TCR)を介する活性化シグナルを制御する新たな2つの分子CASTとJak3の役割について解析した。CASTはそのdominant negative型の発現によってNFATの活性化が抑制されたが、更にstable transfectantにおいてはIL-2産生が抑制された。CASTの細胞内分布では、核内に多く存在することが判明し、シグナル伝達系以外の機能を示唆する。Jak3がTCR複合体に会合し、活性化に伴ってリン酸化を受け、dominant negative型は抗原特異的IL-2産生が著しく抑制する。TCRシグナル伝達における位置を解析した。Lck/ZAP-70がJak3のリン酸化を行い、CD3ζやZAP70には影響しないが、LAT,SLP-76,STAMのリン酸化を誘導する。一方、STATのリン酸化に大きな変化は無かった。これらからJak3はTCRシグナル伝達系を担う分子であることが明らかになった。引き続きCTLA-4の発現制御とネガティブシグナルの伝達機構を正常T細胞に種々の変異CTLA-4を導入して解析した。細胞内チロシンモチーフは表面発現に重要でが、IL-2産生のネガティブシグナルの形成には不要で、むしろ細胞膜近傍領域が重要である。T細胞分化におけるシグナルの解析では、CD3γの異なるスプライシング分子pTAC12がプレT細胞に特異的に発現しているのは、転写レベルではなく蛋白レベルの制御であることが判明した。また、TCRシグナルは、ポジティブ/ネガティブ選択の制御のみならず、CD4vsCD8のlineage決定にも関わっていることをin vivoのシステムで証明した。

研究成果

• [文献書誌] Wakizaka,K.: "A novel 90kDa tyrosine-phosphorylated protein associated with TCR complex in thymocytes." Eur.J.Immunol.28. 636-645 (1988)
• [文献書誌] Adachi,S.: "Essential role of IL-7 receptor α in the formation of Peyer's patch anlage." Int.Immunol. 10. 1-6 (1988)
• [文献書誌] Saito,T.: "Negative regulation of T cell activation." Curr.Opin.Immunol.10. 313-321 (1988)
• [文献書誌] Saito,T.: "Positive and negative thymocyte selection." Crit.Rev Immunol. 18. 359-370 (1988)
• [文献書誌] Park,S.Y.: "Resistance of Fc receptor-deficient mice to fatal glomerulonephritis." J.Clin.Inv.102. 1229-1238 (1988)
• [文献書誌] Kametani,Y.: "Ex vivo evidence for asymmetric tyrosine phosphorylation of ZAP-70 on double-positive thy-mocytes in the positive selection process." Int.Immunol.10. 1203-1210 (1988)
• [文献書誌] Miyatake,S.: "Src family tyrosine kinases associate with and phosphorylate CTLA-4(CD152)" Biochem.Biophys.Res.Commun.249. 444-448 (1998)
• [文献書誌] Ohno,H.: "The medium subunits of adaptor complexes recognize distinct overlapping sets of tyrosine-based sorting signals." J.Biol.Chem.273. 25915-25921 (1998)
• [文献書誌] Gibbins,J.M.: "The p85 subunit of phosphatidylinositol 3-kinase associates with the Fc receptor γ-chain and LAT in platelets stimulated by collagen and convulxin" J.Biol.Chem.273. 34437-34443 (1998)
• [文献書誌] Takase,K.: "Molecular cloning of pTAC12,an alternative splicing product of the CD3γ chain as a compo-nent of the pre-T cell antigen-receptor complex." J.Biol.Chem.273. 30675-30769 (1998)
• [文献書誌] Regnault,A.: "FcRγ-mediated induction of dendritic cell maturation and MHC class I-restricted antigen pre-sentation after immune complex internalization." J.Exp.Med.189. 371-380 (1999)
• [文献書誌] van Egmond,M.: "Human IgA receptor(FcaRI,CD89)function in transgenic mice requires both FcRγ chain and DR3(CD11β/CD18)." Blood. (in press).
• [文献書誌] Yamazaki,T.: "The 10th International Congress of Immunology" Monduzzi Editore S.p.A., 189-194 (1988)
• [文献書誌] Otsuji,M.: "Redox bilogy" Academic Press (In press),