慢性関節リウマチの原因ウイルスに関する研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10307012
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 佐々木 毅 東北大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (50110656)
• 研究分担者: 宗像 靖彦 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (20271950) ; 柴田 忍 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (00271932) ; 舩渡 忠男 東北大学, 大学院・医学系研究科, 講師 (70165455) ; 石井 惠子 東北大学, 医学部・附属病院, 講師 (00291253) ; 亀岡 淳一 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (30261621)
• キーワード: 慢性関節リウマチ / ヒトパルボウイルスB19 / TNFα / マクロファージ

研究概要

1.RA例でのB19中和抗体能の検索
B19感染赤芽球系細胞株KU812Ep6にてB19中和抗体測定系を確立した。B19感染自然治癒例では、高い中和能(70%以上の感染阻止率)を認めた。一方、B19持続感染を呈するRA例では抗B19-IgG抗体が検出されても、中和能が低下(30%未満の感染阻止率)を呈した。
2.免疫系細胞でのin vitro B19持続感染モデルの作成
B19のエリスロポイエチン添加の赤芽球株KU812Ep26へのB19感染において、著明なB19DNA量の増加、VP-1陽性細胞の増加がもたらされた。一方、マクロファージ、Mψ株U937へのB19感染においては、有意のB19DNA増加を検出し難かったが、軽度の、しかし、有意のB19-NS-1 mRNAの経時的な増加を認めた。B19は赤芽球系細胞では急激な増殖を示し、宿主細胞死をもたらすが、免疫系細胞での感染では、穏徐に増殖し、持続感染化することを示すと推定される。
3.RA由来B19ウイルス機能を担うNS-1領域を規定する遺伝子をMψ株U937に挿入しクロンとして作出した(NS-1 U937)。このクロンの解析におりNS-1はU937のAP-1遺伝子と結合し、RA病態発現に重要な炎症性サイトカインTNFα産生を惹起した。これらの所見はNS-1に対するアンチセンスリボザイムの使用により著明により抑制された。
4.in vivoでのRAモデルB19トランスジェニックマウスの作出
B19 NS-1遺伝子のトランスジェニックC57BI/6B6マウスを作成した。B6マウスでは遺伝的因子により関節炎を惹起しにくいがトランスジェニックB6ではタイプIIコラーゲン誘発多発関節炎が著明に高い頻度で出現した(投稿準備中)。

研究成果

• [文献書誌] Rahman,M.,Sasaki,T., et al.: "A repressor element in the 5'-untranslated region of human Pax5 exon 1A."Gene. 263. 59-66 (2001)
• [文献書誌] Takahashi,M,Sasaki,T, et al.: "Measurement of tumor necrosis factor-α messenger RNA in synovial fibroblasts by real-time quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction."J.Lab.Clin.Med.. 137. 101-106 (2001)
• [文献書誌] Suzuki,Y.,Sasaki,T., et. al.: "Chemically modified ribozyme to V gene inhibits anti-DNA production and the formation of immune deposits caused by lupus lymphocytes."J.Immunol.. 165. 5900-5905 (2000)
• [文献書誌] Funato,T., Sasaki,T., et al.: "Anti-K-ras rybozyme induced a growth inhibition and an increased chemosensitivity of human colon cancer cells."Cancer Gene Therapy. 165. 495-500 (2000)
• [文献書誌] Funato,T.,Sasaki,T., et.al.: "In vitro leukemia cell models of Ara-C resistance."Leukemia Research. 24. 535-541 (2000)
• [文献書誌] Takahashi,S,Sasaki,T, et al.: "Cloning of a coproporphyrinogen oxidase promoter regulatory element binding protein. "Biochem.Biophy.Res.Com.. 273. 596-602 (2000)