| 研究概要 |
筋萎縮性側索硬化症(ALS)の病態機序を明らかにし治療法を解明していくために,家族性ALSで同定されたSOD1遺伝子変異による細胞障害機構を明らかにすることを目的とした。SOD1変異を有する家族性ALS症例の剖検脊髄の病理学的所見からLewy-body like hyaline inclusion body(LBHI)が観察される例があり,抗SOD1抗体で陽性であることから,変異SOD1がLBHIの形成,細胞障害に関与すると考え、変異SOD1による凝集体形成,細胞障害機構の解析を試みている。本年度においては家族性ALSで同定された遺伝子変異をSOD1 cDNAに組み込み、これにFLAG tagをつけて,一過性発現の実験系を確立した。この変異SOD1 cDNAをCOS細胞にトランスフェクションで導入し、発現する変異SOD1の挙動を免疫組織学的に検討したところ,アポトーシスは誘導されないものの発現する変異Cu/Zn SODが細胞内で凝集体を形成することを明らかにした。また,このような凝集体形成は野生型のSOD1では観察されず,変異SOD1に特異的な現象であることが判明した。現在この変異SOD1の物性を解析し形成機構を解明することを目的として、バキュウロウイルスを用いて、大量の組換え変異SOD1の精製を行っている。また,神経細胞に変異SODを安定に発現させるために,アデノウイルスベクターに,上記の家族性ALSで同定された変異を有するSOD1 cDNAを組み込む作業が進行中である。
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