進行性多巣性白質脳症の発生機構の解析

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10357002
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 長嶋 和郎 北海道大学, 医学部, 教授 (50010377)
• 研究分担者: 田中 伸哉 北海道大学, 医学部, 助手 (70261287) ; 澤 洋文 北海道大学, 医学部, 助教授 (30292006)
• キーワード: JCウイルス / 転写調節領域 / ウイルス受容体 / yeast two hybrid / 神経組織特異性

研究概要

進行性多巣性白質脳症(progressive multifocal leukoencephalopathy:PML)はポリオーマウイルスに属する2本鎖環状DNAウイルスであるJCウイルス(JCV)が原因である。しかしながらJCVがヒト脳の脱髄疾患であるPMLを引き起こす詳細なメカニズムは不明であり、根治的な治療法は全くない。治療法確立の前段階として、我々はJCVの感染および増殖メカニズムを解明するために、
1)ウイルス受容体の同定、単離、
2)ウイルス転写活性化機構の解析を試みた。
ウイルス受容体を同定するために、JCウイルス外郭蛋白 VP1 を C_<OS>7 細胞で発現させることにより、recombinant偽ウイルス粒子作成法を確立した。偽ウイルス粒子は電子顕微鏡的にウイルス粒子構造が確認され、また、bona fide粒子同様に赤血球凝集活性を有していた。偽ウイルス粒子は内部にゲノムをもたないため外来遺伝子を挿入することが可能であり、我々の開発したjcウイルスベクターは受容体単離のみならず神経系組織への遺伝子治療を目的とするベクターとして使用可能である。
転写活性化機構の解析については、HTLV-I 感染者に発症したPMLの解析から、Tax蛋白に着目し、Taxがnauroglial cell においてJCウイルスの転写を活性化することを明らかにした。また、JCウイルス転写能の神経特異性についてはTax共沈する未知の蛋白を同定し現在論文投稿中である。

研究成果

• [文献書誌] Takahashi, RH., et al: "Analysis of human lymphotropic T-cell virus type II-like particle production by recombinant baculovirus-infected insect cells"Virology. 256. 371-180 (1999)
• [文献書誌] Nagashima, T., et al.: "Wernicke encephalopathy-like symptoms as an early manifestation of Creutzfeldt-Jakob disease in a chronic alcoholic"J Neurol Sci. 163(2). 192-198 (1999)
• [文献書誌] Suzuki, G., et al.: "Pertussis toxin-sensitive signal controls the trafficking of thymocytes across the corticomedullary junction in the thymus"J Immunol. 162. 5981-5985 (1999)
• [文献書誌] Takahashi, H., et al.: "Characterization of antibodies raised against bovine-PrP-peptides"J Neurovirol. 5. 300-307 (1999)
• [文献書誌] Takahashi, H., et al.: "Increased levels of and isoforms of 14-3-3 proteins in cerebrospinal fluid in patients with Creutzfeldt-Jakob disease"Clin Diagn Lab Immunol. 6. 983-985 (1999)
• [文献書誌] Suzuki, T., et al.: "A method for detection of a cytokine and its mRNA in the central nervous system of the developing rat"Brain Res Brain Res Protoc. 4(3). 271-279 (1999)
• [文献書誌] Shishido-Hara, Y., et al.: "Analysis of capsid formation of human polyomavirus JC (Tokyo-1 strain) by a eukaryotic expression system : splicing of late RNAs, translation and nuclear transport of major capsid protein VP1, and capsid assembly"J Virol. 174. 1840-1853 (2000)