1999 年度実績報告書

葉緑体形質転換に基づく葉緑体遺伝子の機能解析

研究課題

研究課題/領域番号	10440238
研究機関	名古屋大学
研究代表者	杉田護名古屋大学, 人間情報学研究科, 教授 (70154474)
研究分担者	廣瀬哲郎名古屋大学, 遺伝子実験施設, 助手 (30273220) 杉浦昌弘名古屋大学, 遺伝子実験施設, 教授 (80027044)
キーワード	タバコ / 葉緑体 / 葉緑体形質転換 / ycf / 光合成 / 低分子RNA / DNAマイクロアレイ
研究概要	本研究はタバコの葉緑体ゲノムに存在するycfの機能を解明すること、及び新規の低分子RNA遺伝子を探索しその機能を解明することを目的とする。 (1)タバコ葉緑体のycf1、ycf2(orf2280)、ycf5(orf313)、ycf6(orf29)のコード領域をaadA遺伝子(スペクチノマイシン耐性を付与する)で置換したプラスミドを3種類のタバコ栽培品種ブライトイエロー4、キサンチ、プチハバナそれぞれの葉にパーテイクルガン法で導入した。その結果、キサンチが葉緑体形質転換実験に適した品種であることを明らかにした。 (2)ycf1ノックアウトタバコと想定される葉緑体形質転換株が得られた。タバコの葉の形態異常、未発達葉緑体の形成、光化学系2の活性低下が観察された。 (3)葉緑体ゲノムの新規の低分子RNA遺伝子探索のためのツールとして、タバコ葉緑体DNAマイクロアレイを作製した。

[文献書誌] Sugita, C., Mutsuda, M., Sugiura, M., Sugita, M.: "Targeted deletion of genes for eukaryotic RNA-binding proteins, Rbp1 and Rbp2, in cyanobacterium Synechococcus sp. strain PCC7942: Rbp1 gene is indispensable for cell growth at low temperatures."FEMS Microbiol. Lett.. 176. 142-147 (1999)
[文献書誌] Nakamura, T., Ohta, M., Sugiura, M., Sugita, M.: "Chloroplast ribonucleoproteins are associated with both mRNAs and intron-containing precursor tRNAs."FEBS Lett.. 460. 437-441 (1999)
[文献書誌] Mutsuda, M., Sugiura, M., Sugita, M.: "Physiological characterization of RNA-binding protein-deficient cells from Synechococcus sp. strain PCC7942."Plant Cell Physiol.. 40. 1203-1209 (1999)
[文献書誌] Kapoor, S., Sugiura, M.: "Identification of two essential sequence elements in the nonconcensus type II PatpB-290 plastid promoter by using plastid transcription extracts from cultured tobacco BY-2 cells."Plant Cell. 11. 1799-1810 (1999)
[文献書誌] 杉田護、杉浦昌弘、広瀬哲郎: "遺伝子遺伝子発現における転写後調節"蛋白質核酸酵素. 45. 132-138 (2000)
[文献書誌] Sugita, C., Sugiura, M., Sugita, M.: "A novel nucleic acid-binding protein in the cyanobacterium Synechococcus sp. PCC6301: a 33 kDa soluble polypeptide with high sequence similarity to ribosomal protein S1."Mol. Gen. Genet.. (印刷中). (2000)