細胞の増殖分化に関わる因子ホスファチジルイノシトール3キナーゼの役割

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10460037
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 福井 泰久 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (00181248)
• 研究分担者: 永田 諭志 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 講師 (40246682) ; 伊原 さよ子 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (80292788)
• キーワード: リン脂質 / ホシファテシジルイノシトールキナーゼ / 組織応答 / 分化 / アダプター / イノシトールリン脂質 / MAPキナーゼ / ホスホリパーゼ

研究概要

ホスファチジルイノシトール3キナーゼは生体内ではPIP_3を生じる。PIP_3は重要な2次メッセンジャーの担い手としていろいろな下流因子の活性化にあずかる。しかし、現在のところ多様なPIP_3の役割を説明するに十分な下流因子が同定されているとは言いがたく、本研究ではあらたなPIP_3結合タンパク質の性質の解明を行った。PIP3BPは核に存在するPIP_3結合タンパク質でArf-GAPと相同性があることから小胞輸送に関与していると考えられる。本年度はすでに同定したPIP3BP結合タンパク質BPキネシンを研究するため、モノクローナル抗体を作成した。また、一方ではあらたにSWAP70と呼ばれるタンパク質をPIP_3結合タンパク質として同定した。このタンパク質はB細胞特異的recombinaseのサブユニットと言われており、immunoglobulinのクラススイッチとの関係に興味がもたれる。SWAP70の局在を調べたところ、細胞質に限局していたが、活性型ホスファチジルイノシトール3キナーゼを共発現させたところ、核にも移行することがわかった。この移行はホスファチジルイノシトール3キナーゼ阻害剤に感受性であったため、PIP_3と結合することが核移行になんらかの役割を果たしていることが示唆された。また、SWAP70を昆虫細胞で大量発現させ、精製した。精製したタンパク質を用いて試験管内での核移行を検討した。その結果、試験管内ではSWAP70はATP依存性に核に移行することがわかった。この系を用いてのPIP_3の役割の検討が待たれる。

研究成果

• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "Downstream of phosphatidylinositol-3 kinase,a multifunctional signaling molecule,and its regulation in cell responses"J.Biochem. 124. 1-7 (1998)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "Specific detection of phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate binding proteins by the PIP3 analogue beads : an application for rapid purification of the PIP3 binding proteins"Biochim Biophys Acta.. 24. 292-302 (1998)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "Microinjection of activated phosphatidylinositol-3 kinase induces process outgrowth in rat PC12 cells through the Rac-JNK signal transduction pathway"J Cell Sci.. 111. 907-915 (1998)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "Density dependent elevation of phosphatidylinositol-3 kinase level in rat 3Yl cells"Biochim Biophys Acta.. 1401. 113-120 (1998)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "Synthesis of diacylglycerol analogs of phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate"Tetrahed.Let.. 39. 9485-9488 (1999)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "Dedifferentiation of Adenocarcinomas by Activation of Phosphatidylinositol 3-kinase"Proc Natl Acad Sci USA. 96. 4874-4879 (1999)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "The structural requirement of phosphatidylinositols as substrate of phosphatidylinositol 3-kinase"Tetrahed.Let.. 40. 1693-1696 (1999)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "Cyclin D1 expression mediated by phosphatidylinositol 3-kinase through mTOR-70S6K-independent signaling in growth factor-stimulated NIH3T3 fibroblasts"Mol.Cell.Biol.. 19. 1346-1358 (1999)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "Increased insulin sensitivity and hipoglycemia in mice lacking p85a regulatory subunit of phosphoinositide 3-kinase"Nat.Genet.. 21. 230-235 (1999)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "An evidence that a phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate binding protein can function in nucleus"J.Biol Chem.. 274. 3919-3922 (1999)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "Identification of protein kinasa B (PKB) as a phosphatidylinostitol 3,4,5-trisphosphate binding protein in Dictyostelium discoideum"Biosci.Biotech.Biochem.. 63. 368-372 (1999)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "Adenoviral gene transfer of activated phosphatidylinositol 3'-kinase and Akt inhibits apoptosis of hypoxic cardiomyocytes in vitro"Circulation. 100. 2373-2379 (1999)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "Dedifferentiation of adenocarcinomas by activation of phosphatidylinositol 3-kinasa"Proc Natl Acad Sci USA. 96. 4874-4879 (1999)
• [文献書誌] Fukui,Y.,et al.: "In vitro and in vivo suppression of osteoclast function by adenovirus vector-induced csk gene"J.Bone Miner Res.. 15. 41-51 (2000)