ネコゲノム解析に関する基盤研究

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10460138
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 亘 敏広 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (50220950)
• 研究分担者: 佐藤 均 東京大学, 医科学研究所, 助手 (70183829) ; 辻本 元 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (60163804)
• キーワード: ネコ / ゲノム解析 / 癌抑制遺伝子 / 免疫グログリン遺伝子 / T細胞レセプター遺伝子 / in situ ハイブリダイゼーション / 腫瘍 / p53

研究概要

ネコのゲノム解析による腫瘍化の分子機構の解明のため、本年度はがん抑制遺伝子(p53)、Cdkinhibitor遺伝子、免疫グログリン(Ig)およびT細胞レセプター(TCR)遺伝子のネコゲノムにおけるマッピングを行った。
ネコp53ゲノミックDNAクローンをラベルし、ネコの前中期染色体標本を用いて、in situハイプリダイゼーションを行った。その結果、ネコp53遺伝子はネコE1染色体短腕p14→T13に存在することが明らかとなった。この結果は今後の細胞遺伝学的解析にきわめて重要な情報を提供するものと考えられる。Cdk inhibitor遺伝子については、ネコのp16(INK4A/MTS1)およびp15(INK4B/MTS2)遺伝子のゲノミッククローンを単離した。in situハイブリダイゼーションを行った結果、p16およびp15遺伝子は、いずれもネコD4染色体長腕q12に存在することが明らかとなった。さらに、サザンプロット解析の結果、ネコのリンパ腫において同領域の一方の染色体欠失が認められた。
一方、ネコ末梢血単核球cDNAを鋳型とし、Ig hcavy chain(IgH)のμ鎖とγ鎖、およびTCR β鎖、γ鎖、δ鎖の遺伝子をPCR法によって増幅した。ネコ×げつ歯類の雑種細胞パネルを用い、染色体マッピングを行った結果、IgHμ鎖、IgHγ鎖、TCRα鎖、TCRβ鎖はネコB3染色体に、またTCRβ鎖、TCRγ鎖はネコA2染色体に存在することが明らかとなった。これら、IgおよびTCR遺伝子の染色体マッピングの結果は、今後のリンパ系腫瘍発生の細胞遺伝学的解析にきわめて有用と考えられる。

研究成果

• [文献書誌] Cho, K.W.et al: "Assignment of the cat p53 tumor suppressor gene(TP53)to cat chromosome E1p14-P13 by fluorescence in situ hybridization." Cytogenet.Cell Genet.79. 145-146 (1998)
• [文献書誌] Cho, K.W.et al: "Cloning and mapping of cat(Felis catus)immunoglobulin and T-cell receptor genes." Immunogenetics. 47. 226-233 (1998)
• [文献書誌] Mizuno, T.et.al.: "Molecular cloning of feline Fas antigen and Fas ligand cDNAs." Vet.Immunol.Immunopathol.65. 161-172 (1998)
• [文献書誌] Endo, Y.et al.: "Molecular cloning of CC-chemokine cDNAs." Vet.Immunol.Immunopathol.65. 113-123 (1998)
• [文献書誌] Endo, Y.et al: "Clinocopathological and immunological characteristics of 6 cases with granular lymphocyte tumors in cats." Comp.Immunol.Microbiol.Infec.Dis.21. 27-42 (1998)
• [文献書誌] Nishimura, Y.et al: "Genetic heterogeneity in the env gene of FIV clones obtained from various districts in Japan." Virus Res.57. 101-112 (1998)