調圧伝達・脳虚血因子ドーパ照明及び同トランスポーター分子の同定・発現・機能解析

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10470026
• 研究機関: 横浜市立大学
• 研究代表者: 五嶋 良郎 横浜市立大学, 医学部, 教授 (00153750)
• 研究分担者: 佐々木 幸生 横浜市立大学, 医学部, 助手 (10295511) ; 宮前 丈明 横浜市立大学, 医学部, 助手 (00239435)
• キーワード: L-ドーパ / 弧束核 / 圧受容体反射 / 線条体 / 虚血 / 神経細胞死 / トランスポーター / 海馬

研究概要

[I]ラット孤束核系[1]圧受容器-大動脈減圧神経-孤束核-尾側腹外側延髄DOPA性圧受容情報伝達投射系:(1)孤束核電気的破壊は,尾側・吻側腹外側延髄DOPA組織含量を減少した.(2)大動脈神経間歇刺激は同側尾側腹外側延髄微量透析間にDOPA遊離を反復一定して誘発した.(3)圧受容器刺激は同DOPA遊離を誘発し,この遊離は孤束核降圧部の急性電気的破壊により消失した.[2]孤束核単離細胞パッチクランプ,DOPA自体のhigh voltage activated(HVA)Ca2+チャネル電流促進作用:DOPA0.1-1mMはDOPA ME-感受性(1mM)に,HVA Ca2+チャネル電流を最大50%増大した.[II]脳虚血・遅発性神経細胞因子DOPAの証明:内因性遊離DOPAは脳虚血グルタミン酸遊離-遅発性神経細胞死の上流因子である:4血管閉塞脳虚血モデル線条体微量透析系において,(1)虚血はDA,グルタミン酸遊離の増大を伴って,DOPA遊離を増大した.線条体に軽度,海馬に中等度〜軽度の遅発性神経細胞死が生じた.(2)強力・比較的安定なDOPA競合的拮抗薬DOPA CHEの虚血前線条体内灌流は,用量依存性にグルタミン酸遊離を抑制(最大抑制80%),線条体遅発性神経細胞死を保護した.[III]DOPAトランスポーター系:(1)種々の動物組織由来polyA+RNAをアフリカツメガエル卵母細胞に注入,[14C]DOPAの取り込み活性を測定し,ウサギ小腸上皮が最も高い活性を示した.DOPA輸送部位は中性塩基性アミノ酸輸送体の基質特異性を有し,適合するアミノ酸輸送系はb0,+系あるいはy+L系であった.(2)アンチセンスの結果はrBATが同DOPA取り込み活性の必須因子であることを示した.一方,ラット中枢におけるDOPA取り込み部位は視床下部正中隆起外側,同視索上核,孤束核,小脳バーグマングリア,海馬等に見られた.海馬における取り込みは50%程度Na+,Cl--依存性画分を有していた。

研究成果

• [文献書誌] 三須良實 古川信也 等: "内因性遊離DOPAは脳虚血-グルタミン酸遊離-神経細胞死の上流因子か?"日薬理誌. 112補冊1. 93-97 (1998)
• [文献書誌] Miyamae T.Goshima Y et al.: "Some interactions of L-DOPA and its related compounds with glutamate receptors"Life Sci. 64. 1045-1054 (1999)
• [文献書誌] Nishiyama M.Miyamae T et al.: "An L-DOPA ergic relay from the posterior hypothalamic nucleu's to the rostral ventrolateral medulla and its cardiovascular function in anesthetizrats."Neuroscience. 92. 123-135 (1999)
• [文献書誌] Miyamae T.Goshima Y et al.: "L-DOPAergic components in the caudal ventrolateral medulla in baroreflex neurotransmission."Neurosience. 92. 137-149 (1999)
• [文献書誌] Honjo K.Goshima Y et al.: "GABA may funotion via GABAA receptors to inhibit hypotension and bradycardia by L-DOPA microinjected into depressor sites of the nucleus tratus solitarii in anesthetized rats."Neurosci.Lett.. 261. 93-96 (1999)
• [文献書誌] Goshima Y.Honjo K et al.: "The evidence for tonic GABA ergic regulation of basal L-DOPA release viaactivation of inhibitory GABAA recepters in the nucleas tractus sclitarii of anesthetized rats."Neurosci.Lett.. 261. 155-158 (1999)
• [文献書誌] Furukawa N,Goshima Y et al.: "L-DOPA cyclohexyl ester is a ncvel potent and relatively stable cometitive antagonist against L-DOPA among Several L-DOPA ester compounds."Jpn.J.Pharmacol. 82. 40-47 (2000)
• [文献書誌] Ishii H,Sasaki Y et al.: "Invclvement of rBAT in Na+-dependent and -independent transpcrts of the nearotransmitter candidate L-DOPA in Xenopus laevis oocytes injected with rabbit small intestinal epithelium polyA+RNA."Biochim.Biophys.Acta. (2000)