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1999 年度 実績報告書

神経芽細胞種における自然退縮の分子機構とその治療への応用

研究課題

研究課題/領域番号 10470044
研究機関千葉県がんセンター

研究代表者

中川原 章  千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 部長 (50117181)

研究分担者 中村 洋子  千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 研究員 (60260254)
影山 肇  千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 研究員 (50260253)
尾崎 俊文  千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 研究員 (40260252)
磯貝 恵理子  千葉県がんセンター, 研究局・生化学研究部, 研究員 (40300917)
キーワードNeuroblastoma / regression / spoptosis / TrkA / MYCN / GDNF / Survivin / p73
研究概要

(1)神経芽細胞腫新鮮組織材料を用いた解析
過去3年間に全国の施設から送られてきた600例の経芽細胞腫新鮮組織材料を対象に、DNA ploidy、MYCN増幅、TrkA発現、1p36 loss of heterozygosity(LOH)について解析した。その結果、自然退縮する腫瘍は、aneuploidy,single copy of MYCN,TrkA高発現,1p36LOHなし,と相関するが,なかでもTrkA発現レベルが予後を大きく左右する因子であることが明らかになった。
(2)神経芽細胞腫細胞株を用いた神経細胞死の分子機構の解析
神経芽腫培養細胞CHP134を用いて、GDNF/Retシグナルによって抑制されるレチノイン酸誘導神経細胞死のin vitroシステムを確立し、その分子機構を解析した。その結果、1)Caspaseファミリー分子では、Caspase-1,3,9の発現誘導と活性化が見られたが、その他のCaspasesは変化しなかった。5つのIAPファミリー遺伝子の中では、Survivinのみが強く発現抑制された。2)p53の経路では、p21^<WAF1>の一過性誘導がみられたが、Bax,PIG3,Mdm2などの誘導は見られなかった。3)ミトコンドリアの膜電位の低下が見られた。4)この細胞死は、グリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)またはニュールチュリン(NTN)の存在下で抑制することができた。したがって、レチノイン酸誘導神経細胞死は、ミトコンドリア=>Caspase-9,3の死シグナル経路の活性化が中心となっているものと思われた。しかしながら、GDNF/NTNによる神経細胞死抑制の分子機構については今後さらに解析する必要がある。
(3)新規細胞死抑制分子、Survivinの機能解析
近年、進行神経芽細胞腫において高頻度に17qゲインが見られることが明らかになってきたが、我々はSurvivin(-α)がその原因遺伝子のひとつである可能性を示した。さらに、活性領域であるBIRドメインにインサートの入った新規スプライスバリアント(Survivin-βと命名)を見出し、βが機能消失型であることを示し、αとβがmicrotubuleへの結合において競合することを明らかにした。したがって、Survivinは神経芽細胞腫の生存と細胞死を制御する重要な分子であることが強く示唆された。
(4)発生過程における神経細胞死の制御に重要な役割を果たしているp73の機能について解析した。その結果、p53には存在しないp73のCOOH-末端領域が転写活性化能を負に、アポトーシス誘導能を正に制御していることを見出した。

  • 研究成果

    (13件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (13件)

  • [文献書誌] Takada N.,Nakagawara A.et al.: "Identification of a transactivation activity in the carboxy-terminal region of p73 which is impaired in the naturally occurring mutants found in human neuroblastomas"Cancer Res.. 59. 2810-2814 (1999)

  • [文献書誌] Ozaki T.,Nakagawara A.et al.: "Deletion of the COOH-terminal region of p73 α enhances both its transactivation function and DNA-binding activity but inhibits induction of apoptosis in mammalian cells"Cancer Res.. 59. 5902-5907 (1999)

  • [文献書誌] Sunahara M.,Nakagawara A.et al.: "Mutational analysis of p51A/TAp63γ,a p53 homolog,in non-small cell lung cancer and breast cancer"Oncogene. 18. 3761-3765 (1999)

  • [文献書誌] Ichimiya S.,Nakagawara A.et al.: "p73 at chromosome 1p36.3 is lost in advanced stage neuroblastoma but its mutation is infrequent"Oncogene. 18. 1061-1066 (1999)

  • [文献書誌] Kato S.,Nakagawara A.et al.: "Transcriptional activities of p51/p63 missense mutations on the p53-downstream gene promoters"Cancer Res.. 59. 5908-5911 (1999)

  • [文献書誌] Ikawa S.,Nakagawara A.et al.: "p53 family genes : structural comparison,expression and mutation"Cell Death Differ.. 6. 1151-1161 (1999)

  • [文献書誌] Kaneko Y.,Nakagawara A.et al.: "Disomy 1 with terminal 1p deletion was frequent in mass screening-negative/late presenting neuroblastomas in young children, but not in mass screening-positive neuroblastomas in infants"Int.J.Cancer. 80. 54-59 (1999)

  • [文献書誌] Han S.,Nakagawara A.et al.: "Infrequent somatic mutations of the p73 gene in various human cancers"Eur.J.Surg.Oncol.. 25. 194-198 (1999)

  • [文献書誌] Yang H-W.,Nakagawara A.et al.: "Development of a polyclonal antibody with defined specificity against synthetic peptides from the N-myc oncoprotein, using multiple antigen peptide and hemocyanin conjugation methods"J.Pediatr.Surg.. 34. 454-460 (1999)

  • [文献書誌] Nishio S.,Nakagawara A.et al.: "Thoracic paravertebral genglioneuroma with high immunohistochemical expression of TrkA"Neuropathol.. 19. 54-56 (1999)

  • [文献書誌] Hirai M.,Nakagawara A.et al.: "1q23 gain is associated with progressive neuroblastoma resistant to aggressive treatment"Genes Chromosomes Cancer. 25. 261-269 (1999)

  • [文献書誌] Sugimoto N.,Nakagawara A.et al.: "The human caspase-activated Dnase(CAD)gene : genomic structure,exonic single-nucleotide polymorphisms, and a highly polymorphic dinucleotide repeat at the CAD locus"J.Hum.Genet.. 44. 408-411 (1999)

  • [文献書誌] Kaneko Y.,Nakagawara A.et al: "Disomy 1 with terminal 1p deletion was frequent in mass screening-negative/late presenting neuroblastomas in young children, but not in mass screening-positive neuroblastomas in infants"Int.J.Cancer. 80. 54-59 (1999)

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公開日: 2001-10-23   更新日: 2016-04-21  

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