ステロイド依存性アポトーシスにおけるDIG-1遺伝子の機能解析

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10470053
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 上出 利光 北海道大学, 遺伝子病制御研究所, 教授 (00160185)
• 研究分担者: 岩田 誠 三菱化学, 生命科学研究所, 主任
• キーワード: ステロイド / アポトーシス / アネキシンV / 遺伝子導入マウス / 胸腺細胞

研究概要

平成11年度に樹立したDIG-1遺伝子トランスジェニックマウス(以下DIG-1 TGと略する)の3系統を用いて研究を行った。DIG-1 mRNAの発現の異なるB(高発現TG)、C(中等度発現TG)、及びE(低発現TG)を解析に用いた。対照群に比し、BとC系統のTGでは、胸腺重量が有意に低下していた。B、C、Eの全ての系統において、100μgのデキサメサゾン(以下DEX)の腹腔内投与12時間後の胸腺重量および胸腺細胞数は有意な低下を示し、アネキシンV陽性のアポトーシス細胞が増加した。50μgのDEX投与によっても同様の結する目的でlckプロモーターを用いてDIG-1遺伝子導入マウスの作製を行った。異なるコピー数の遺伝子が果を得たが、300μgのDEX投与では、TG群と対照群間にアネキシンV陽性アポトーシス細胞数で有意な差は認められなかった。DEX投与後アポトーシスを示す細胞は主に、胸腺皮質で存在し、TGでは脾臓でも増加していた。TGおよび対照群より胸腺細胞を分離し、10^<-7>〜10^<-11>MのDEX存在下に16時間培養し、アネキシ陽性細胞数を検討した。10^<-9>〜10^<-11>M及び0Mで、B系統は50%アネキシンV陽性となるのに対し、対照群では約35%であり、陽性数に有意な差を認めたが、TG胸腺細胞のDEXに対する感受性に差は全く認められなかった。次にアポトーシス関連分子であるBcl-2とBAX蛋白の発現をDEX投与前後で検討した。TG胸腺細胞におけるBclとBAX蛋白の発現はDEX投与前後で有意な変化はなく、対照群と比較しても有意な差は認められなかった。

研究成果

• [文献書誌] A.Yamada: "Blocking the CD28-B7 T-cell costimulatory pathway abrogates the development of obliterative bronchiolitis in a murine heterotopic airway model."Transplantation. 69(5). 743-749 (2000)
• [文献書誌] N.Shijubo: "Vascular endothelial growth factor and osteopontin in tumor biology."Crit.Rev.Oncog.. 11(2). 135-146 (2000)
• [文献書誌] S.Kon: "Antibodies to different peptides in osteopontin reveal complexities in the various secreted forms."J.Cell.Biochem.. 77(3). 487-498 (2000)
• [文献書誌] S.Chikuma: "Janus kinase 2 is associated with a box 1-like motif and phosphorylates a critical tyrosine residue in the cytoplasmic region of cytotoxic associated molecule-4."J.Cell.Biochem.. 78(2). 241-250 (2000)
• [文献書誌] S.Chiba: "The role of osteopontin in the development of granulomatous lesions in lung."Microbiol.Immunol.. 44(4). 319-332 (2000)
• [文献書誌] M.Takemoto: "Enhanced expression of osteopontin in human diabetic and analysis of its functional role in accelerated atherogenesis."Arteriouscler.Thromb.Vasc.Biol.. 20(3). 624-628 (2000)