Nef及びVprの細胞生物学

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10470078
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 足立 昭夫 徳島大学, 医学部, 教授 (90127043)
• 研究分担者: 明里 宏文 徳島大学, 医学部, 助手 (20294671) ; 小山 一 徳島大学, 医学部, 助教授 (80109074)
• キーワード: HIV / Nef / Vpr / アポトーシス

研究概要

本年度は(1)HIV-1 Nefのウイルス複製サイクルにおける作用点の同定、(2)HIV-1 Vprと抗アポトーシス作用に関する研究が進展し、以下のような結果を得た。(1)Nefは感染後期過程の粒子形成に関与し、子孫ウイルス粒子を修飾してその感染性を高めている。Nef非存在下で産生されたウイルス粒子をCD4陽性細胞に感染させるとNef存在下で産生される粒子による感染よりウイルスDNA合成量が著しく低下している。この結果より、Nefの機能はウイルスエントリーあるいは脱殻/逆転写過程に必要であるとされていた。我々はNef非存在下で種々の細胞由来のウイルスを調整し、感染価とエントリー効率を解析してみた。その結果、ある特定の細胞由来のウイルスが感染価もエントリー効率も低いことがわかった。他の細胞由来のウイルスも野性株に比較して感染価は低かったが、エントリー効率は正常のレベルであった。これらの成績をまとめると、Nefはウイルス産生細胞依存的にエントリー効率に関わること、さらにウイルスDNA合成にも関与していることが示された。(2)Vprのウイルス複製における直接的役割は明らかでないが、細胞増殖の阻害、分化誘導などの細胞生物学的効果が知られている。我々はVprとアポトーシスとの関係を調べた。まず、容易にアポトーシスを誘導し得る細胞にHIV-1Vprを単独発現させた。Vpr発現レベルは極めて低かったが安定な細胞株が樹立された。この細胞にアポトーシスを誘導してみたが、極めて強い抵抗性を示した。この成績より、Vprはアポトーシスを抑制し得ることが明らかになった。

研究成果

• [文献書誌] Inubushi,R.: "The potential of various HIV-1 mutants to inhibit the repli-cation of wild-type virus." Biochemical and Biophysical Research Communications. 247. 349-352 (1998)
• [文献書誌] Shimano,R.: "Suppression of HIV-2 replication by HIV-1 gag mutants." Biochemical and Biophysical Research Communications. 248. 418-421 (1998)
• [文献書誌] Kawamura,M.: "Early function of HIV-1 Gag proteins is cell-dependent." Biochemical and Biophysical Research Communications. 248. 899-903 (1998)
• [文献書誌] Fukumori,T.: "The HIV-1 Vpr displays strong anti-apoptotic activity." FEBS Letters. 432. 17-20 (1998)
• [文献書誌] Tokunaga,K.: "Enhancement of human immunodeficiency virus type 1 infectivity by Nef is producer cell-dependent." Journal of General Virology. 79. 2447-2453 (1998)
• [文献書誌] Tokunaga,K.: "Producer cell-dependent requirement of the Nef protein for efficient entry of HIV-1 into cells." Biochemical and Biophysical Research Communications. 250. 565-568 (1998)