T細胞によるウイルス抗原エピトープの分子認識の研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10470088
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 滝口 雅文 熊本大学, エイズ学研究センター, 教授 (00183450)
• 研究分担者: 平山 和雄 味の素株式会社, 中央研究所, 主席研究員 ; 冨山 宏子 熊本大学, エイズ学研究センター, 助手 (50301370)
• キーワード: 細胞傷害性T細胞 / T細胞レセプター / HLAクラスI / ペプチド / HLAクラスIテトラマー

研究概要

本年度は、HLAクラスI・エピトープペプチド四量体(HLAクラスIテトラマー)を作製し、これを用いて抗原特異的CD8 T細胞を解析した。
1.HLAクラスIテトラマーを用いた抗原特異的CD8 T細胞の測定法の確立:
11種類のHIV-1 CTLエピトープ、1種類のHCV CTLエピトープおよび2種類のHBV CTLエピトープに対するテトラマーを作製し、これによって日本人のHIV-1、HCVおよびHBV感染者の末梢血単核球中の抗原特異的T細胞を、フローサイトメトリーを用いて定量的に測定する方法を確立した。
2.テトラマーを用いたHIV感染者の解析:
テトラマーを用いてHIV感染者の末梢血リンパ球を解析した所、慢性HIV-1感染症の患者ではCD28^-CD45RA^-のeffecter CD8 T細胞の増加がみられた。HAART療法後血中HIV-1 RNA量が大幅に低下すると、この分画のHIV-1特異的CD8^+T細胞の増加はみられなくなる事より、HIV-1特異的CD28^-CD45RA^-CD8 T細胞は、HIV-1抗原を認識して増加している活性型のeffecter T細胞と考えられた。
3.テトラマーを用いたHBVおよびHCV肝炎患者の解析:
テトラマーを用いて急性HCVおよびHBV肝炎患者の急性期の血中より肝炎抗原特異的CD8 T細胞を検出した。血中で増加している特異的T細胞はCD28^+CD45RA^-のメモリーT細胞であった。

研究成果

• [文献書誌] Masafumi Takiguchi: "Analysis of three HLA-A^*3303 binding peptide anchors using an HLA-A^*3303 stabilization assay."Tissue Antigens. 55. 296-302 (2000)
• [文献書誌] Hiroko Tomiyama: "Expansion of HIV-1-specific CD28^-CD45RA^-CD8^+ T cells in chronically HIV-1 infected individuals."AIDS. 14. 2049-2051 (2000)
• [文献書誌] Hiroko Tomiyama: "A single CTL clone can recognize a naturally processed HIV-1 epitope presented by two different HLA class I molecules."Eur.J.Immunol.. 30. 2521-2530 (2000)
• [文献書誌] Katsumi Maenaka: "Nonstandard peptide binding revealed by crystal structures of HLA-B^*5101 complexed with HIV immunodominant epitopes."J.Immunol.. 165. 3268-3274 (2000)
• [文献書誌] Masafumi Takiguchi.: "Polarity of the P1 anchor residue determines peptide binding specificity between HLA-A^*3101 and HLA-A^*3303."Tissue Autigens. 56. 501-506 (2000)
• [文献書誌] Yuji Sobao: "Visual demonstration of HCV-specific memory CD8^+ T cell expansion in patients with acute hepatitis C."Hepatology. 33. 287-294 (2001)