膵外分泌調節におけるCCKと、CCK-A、CCK-B受容体遺伝子発現と機能分担 副題:ヒトおよび自然発症CCK-A受容体欠損ラット、遺伝子ターゲテイングマウスによる検討

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10470145
• 研究機関: (財)東京都老人総合研究所
• 研究代表者: 宮坂 京子 財団法人 東京都老人総合研究所, 臨床生理部門, 研究室長 (90166140)
• 研究分担者: 増田 正雄 財団法人 東京都老人総合研究所, 臨床生理部門, 助手 (20260284)
• キーワード: CCK / CCK-A受容体 / CCK-B受容体 / 膵外分泌 / ノックアウトマウス

研究概要

ヒトでは、CCKは膵酵素分泌を促し、これはCCK-A受容体拮抗剤によって阻害される。にもかかわらず、ヒト膵にはCCK-A受容体遺伝子発現は殆どみられない。膵外分泌調節における、CCKとCCK受容体の役割を検討し、ヒトの膵外分泌調節の解明を計画した。
ヒト膵切除をコラーグン処理し、遊離膵腺房細胞を作製し、刺激に対する反応をしらべた。結は、10-^<12>-10^<-6>MCCK-8S刺激に対して、アミラーゼ分泌は全くおこらなかった。カルパコール、GRP刺激に対しては、用量依存製の分泌反応をしめした。一方、十二指腸切除標本において、1^<125>-CCK-8Sのオートラジオグラフィーをおこなったところ、十二指腸には有意の結合がみられ、この結合はCCK-A受容体拮抗剤の投与で消失し、CCK-B受容体の投与では影響をうけなかった(Digestion, 1999)。ヒト膵にはCCK-A受容体mRNAはNorthern blotでは検出されなかったが、CCK-B受容体mRNAは検出された。CCK-A受容体N-端抗体による免疫組織染色では、ヒト胆嚢は染色されたが、膵は染色されなかった。以上の結果から、ヒト膵のCCK-A受容体は、機能面では、アミラーゼ分泌には関与していないと結論された。また、高濃度のCCK-8S投与によってもアミラーゼ分泌がおきないことから、ヒト膵に存在するCCK-B受容体も、アミラーゼ分泌には直接関与していない、と解釈された。CCK-A受容体欠損ラットでは、CCK-8S投与時に迷走神経胃枝の興奮はおこらなかった(正常ラットでは興奮する)(JANS,1999)。CCK-B受容体遺伝子ノックアウトマウスでは、膵液分泌反応、胆汁分泌(胆嚢収縮)は、ホモ欠損、ヘテロ、正常群とのあいだに全く差がなく、膵臓重量、蛋白含有量、組織像も各genottype間で差がみられなかった(Pancreas,in press)。齧歯類では膵臓のCCK-B受容体は正常ならば胎生期に発現し、生後消失するが、たとえ欠損しても膵臓の形成、成長には全く影響がないことが確認された。CCK-A受容体ノックアウトマウスでは、膵液胆汁分泌はCCKによる刺激に全く反応しなかった。

研究成果

• [文献書誌] Miyasaka K: "Overexpression of cholecystokinin (CCK)-B/gastrin receptor gene in the stomach of naturally occuuring CCK-A receptor gene knockout rats." Digestion. 59. 26-32 (1998)
• [文献書誌] Masuda M: "Inhibitory effect of central dopamine on basal pancreatic secrtion." Am.J.Physiol.274. G29-34 (1998)
• [文献書誌] Miyasaka K: "Role of cholecystokinin (CCK)-A receptor in pancreatic regeneration after pancreatic duct occlusion: A study in rats lacking CCK-A receptor gene expression." Pancreas. 16. 114-123 (1998)
• [文献書誌] Takiguchi S: "A disrupted cholecystokinin A receptor gene acted synergistically with ODB-1 gene to diabetic in obese rats." Am.J.Physiol.274. E265-270 (1998)
• [文献書誌] Miyasaka K: "Incidence of apoptosis in the pancreas of young and old rats." Arch.Gerontol.Geriatr.26. 235-245 (1998)
• [文献書誌] Ichikawa M: "Disappearance of dirunal rhythm of energy expenditure in genetically diabetic obese rats." Jpn J physiol. 48. 211-214 (1998)
• [文献書誌] Miyasaka K: "Luminal feedback regulation,monitor peptide,CCK-releasing prptide,and CCK receptors." Pancreas. 16. 277-283 (1998)
• [文献書誌] Miyasaka K: "Central somatostatin diminished inhibitory action of central CGRP on pancreatic basal secrtion in conscious rats." J Auton Nerv Syst. 73. 143-148 (1998)
• [文献書誌] Funakoshi A: "Mechanism of cholecystokinin-A receptor antagonist on human pancreatic exocrine secretion:Localization of CCK-A receptor in the human duodenum." Digestion. 60 suppl. 75-80 (1999)
• [文献書誌] Miyasaka K: "Atropine-resistant secretion of a puttive luminal cholecystokinin releasing peptide in conscious rats." Am J Physiol. 276. G287-292 (1999)
• [文献書誌] Kurosawa M: "Response of the gastric vagal afferent activity to cholecystokinin in rats lacking type A cholecystokinin receptors." J Auton Nerv Syst. 75. 51-59 (1999)
• [文献書誌] Miyasaka K: "Disruption of cholecysotkinin (CCK)-B receptor gene did not modify bile or Pancreatic secretion or Pancreatic growth.A study in CCK-A receptor gene knockout mice." Pancreas. (in press).
• [文献書誌] Nomoto S: "impaired learning and memory in OLETF rats without cholecystokinin (CCK)-A receptors." Physiol & Behav. (in press).
• [文献書誌] 永松俊哉: "持久的運動トレーニングが急性運動負荷による血漿中消化管ホルモンの変動に及ぼす影響" 体力研究. 95. 1-7 (1998)
• [文献書誌] 自見厚郎: "ラット膵管結紮膵炎における膵管内投与膵分泌性トリプシンインヒビター(PSTI)の膵障害阻害効果。" 膵臓. 13. 25-31 (1998)
• [文献書誌] 船越顕博: "膵炎の器質化、慢性化の病態解明とCamostat経口投与による進展阻止効果の基礎的研究。" 現代医療. 30. 143-147 (1998)
• [文献書誌] 永松俊哉: "身体運動における負荷強度の違いが膵外分泌作用に及ぼす影響" 消化と吸収. 21. 77-80 (1998)
• [文献書誌] 宮坂京子: "図解病態のメカニズム、膵外分泌調節" medicina. 35. 161-165 (1998)
• [文献書誌] 船越顕博: "CCK-A受容体欠損ラットと摂食行動異常。" Frontiers in Gastroenterology. 21. 77-80 (1998)
• [文献書誌] 宮坂京子: "サクセスフルエイジング" ワールドプランニング, 303 (1999)