胸腹部大動脈瘤の病態解明と遺伝子治療-非筋型ミオシン重鎖および細胞外基質分解酵素発現による-

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10470162
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 磯部 光章 東京医科歯科大学, 医学部・附属病院, 助教授 (80176263)
• キーワード: 腹部大動脈瘤 / ミオシン重鎖 / 細胞外器質分解酵素 / 動脈硬化 / 心移植 / リモデリング / アポトーシス

研究概要

昨年に引き続き、腹部大動脈瘤の手術標本を凍結保存し、手術所見や臨床経過(切迫破裂の有無、拡大速度)等で分類し、これらの手術標本を間接抗体法による免疫染色により非筋型および平滑筋ミオシン重鎖、細胞外器質分解酵素の発現を確認した。その結果、急速拡大および切迫破裂例の血管においては、未分化な細胞性質を示す非筋型ミオシン重鎖SMembの発現が血管中膜の紡錘形の細胞に増強しているのに対し、正常血管内の平滑筋細胞で持続的に発現して分化した細胞形質を示すSM2の発現が抑制されていた。また、MMP-2とMMP-9の発現も急速拡大および切迫破裂例の血管の内膜において著しく増強しているのに対し、TIMP-1およびTIMP-2の発現は抑制されていた。In situ RT-PCR法による組織内転写発現の検討でも、上記の免疫染色と同様の結果がそれぞれの血管群で確認している。また血管壁におけるアポトーシスを検討すると、急速拡大および切迫破裂例の壁内にTUNEL陽性細胞が多く観察された。本年は昨年以前に得られたこれらの結果をさらに症例を増やして検討した。またラットを用いた動物実験モデルの作成を試みているが、現状では安定した評価に耐えるモデルが得られていない。MMPとTIMPの発現については、サルの移植心を用いて検討を行っており、移植心冠動脈の新生内膜におけるMT-MMP-1、MMP-2の発現亢進を初めて確認した。また当初の目的である遺伝子治療法の確立に必要な実験的検討のため、MMP-1のアンチセンスの作成と移植心のマウスモデルへの導入を始めた。HVJリポソーム法によりアンチセンス遺伝子の導入モデルを確立した。

研究成果

• [文献書誌] Suzuki J, Isobe M, et.al: "E2F decoy suppresses E-selectin in murine cardiac allograft arteriopat"Transplant Proc. 31. 2018-2019 (1999)
• [文献書誌] Kamijima T, Isobe M, et.al: "Enhanced Embryonic Nonmuscle MHCIsc form And MMP Expression in Aortic Abdominal Aneurysm with Rapid Progression."Cardiovasc Pathol. 8. 291-295 (1999)
• [文献書誌] Suzuki J, Isobe M, et.al: "Antisense bcl-X oligonucleotide induces apoptosis and prevents arterial neointimal formation in murine cardiac allografts."Cardiovasc Res. 45. 783-787 (2000)
• [文献書誌] Isobe M, Suzuki J, et.al: "Cene Therapy for Heart Transplantation-associated Coronary Arteriosclerosis."Ann NY Acad Sci. (in press).
• [文献書誌] Suzuki J, Isobe M, et.al: "Prevention of cardiac allograft arteriosclerosis using antisense proliferating-cell nuclear antigen oligonucleotide."Transplantation. (in press).
• [文献書誌] Suzuki J, Isobe M, et.al: "Altered expression of MMP and TIMP in acutely rejected myocordium and coronary arteriosclerosis in cardiac allografts of nohuman primat"Transplant Immunol. (in press).