Mn-SOD遺伝子治療を用いた悪性腫瘍の集学的治療法に関する基礎研究

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10470196
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 黒田 昌宏 岡山大学, 医学部・附属病院, 講師 (50225306)
• キーワード: Mn SOD / 遺伝子治療 / 放射線治療 / 温熱療法 / 化学療法 / 造腫瘍能 / アポトーシス / 集学的治療

研究概要

1)マウス線維肉腫細胞FSa-IIにin vitroでMn-SOD遺伝子導入した細胞株をC3H/Heマウスに移植し、TCD50法(Kuroda M,et al.:Int J Radiation Oncology Biol Phys 38: 411-417,1997)を用いて、Mn-SOD遺伝子導入により、方射線(低LET線および高LET線)治療、温熱治療、化学療法(5FUおよびMMC)の効果が増強することを確認し、学会にて報告した。
2)Mn-SOD遺伝子を含むプラスミドペクターとin vivoエレクトロポレーション法を用いて、マウス移植腫瘍FSa-IIに対する導入効率を、ヘクター濃度をかえて検討している。
3)マウス線維肉腫細胞FSa-IIにin vitroでMn-SOD遺伝子導入した細胞株を用いて、Mn-SOD遺伝子導入により転移能が消失し、造腫瘍能が低下する機序について、アポトーシスの変化の点から検討し、論文にて報告した。スキッドマウスを用いてMn-SOD遺伝子導入細胞株のin vivoの増殖速度とアポトーシスを検討した結果、Mn-SOD遺伝子導入により、組織中のアポトーシスの発現は減少した。増殖速度は軽度減少するものの優位ではなかった。アポトーシスAnnexin-V EGFPとPIを用いて検討した結果、Mn-SOD遺伝子導入により、温熱治療後のアポトーシスは増加した。

研究成果

• [文献書誌] Masahiro Kuroda et al.: "A new experimental system for irradiating tumors in mice using a linear accelerator under specific pathogen-free conditions"Acta Med Okayama. 53,3. 111-118 (1999)
• [文献書誌] Osamu Honda, Masahiro Kuroda et al.: "Assessment of Secondary Necrosis of Jurkat Cells Using a New Microscopic System and Double Staining Method with Annexin V and Propidium Iodide"Int J Oncology. 16. 283-288 (2000)
• [文献書誌] Masahiro Kuroda et al.: "Overexpression of manganese superoxide dismutase gene suppresses spontaneous apoptosis without a resultant alteration in vivo growth of the mouse fibrosarcoma, FSa-II"Anticancer Res. (In press). (2000)