悪性脳腫瘍に対する遺伝子銃を用いた遺伝子治療法の開発

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10470285
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 淺井 昭雄 東京大学, 医学部・附属病院, 講師 (50231858)
• キーワード: 遺伝子治療 / 遺伝子銃 / グリオーマ / アデノウイルス

研究概要

(1)遺伝子銃によるex vivo遺伝子導入の検討 : 次にF344ラット皮下に移植生育させた9Lグリオーマ腫瘍組織を摘出して、ex vivoで遺伝子銃によりLacZ発現ベクターを導入し、再度、皮下にもどして7日間生着させ、遺伝子導入の効率を検討した。100、200、400、600psiと発射圧に応じて、遺伝子導入効率が最も高い部分で3±1.5%、5-±3.5%、7±5.1%、9±5.5%と増加した。一方、アデノウイルスを感染させた腫瘍では、MOI20、40、100、とウイルス濃度に応じて、遺伝子導入効率が5.5±3.2%、7.8±4.3%、15.9±7.8%と増加した。(2)遺伝子銃による皮下腫瘍組織へのin vivo 遺伝子導入の検討 : (1)と同様にして、皮下にグリオーマ細胞を移植して20日間生育させ腫瘍を形成させ、腫瘍上部の皮膚を切開して、遺伝子銃およびアデノウイルスベクターにより遺伝子導入を試みた。処理後、創部を再縫合して、7日間生育させた。遺伝子銃を用いたものでは、100、200、400、600psiと発射圧に応じて、遺伝子導入効率が最も高い部分で3.6±1.8%、5.9-±4.1%、7.2±4.1%、9.5-±6.5%と増加した。一方、アデノウイルスを感染させた腫瘍では、MOI 20、40、100とウイルス濃度に応じて、遺伝子導入効率が、5.8±4.1%、7.5±4.1%、13.2±7.2%と増加した。以上、遺伝子銃は、アデノウイルスに比して、導入効率が劣るという結果であったが、ウイルスより調製、取り扱いが簡易で、さらに、抗原性、毒性などウイルス固有の問題点を考慮にいれる必要がなく、腫瘍の免疫原性を変える方法等、遺伝子導入効率の大小がcriticalではないような遺伝子治療に有用であることが期待できると考えられる。

研究成果

• [文献書誌] Wenbin C,Asai A,Teramoro A,Sanno N,Kirino T: "Mutations of the MEN1 tumor suppressor gene in sporadic pituitary tumors"Cancer Lett. 142. 43-47 (1999)
• [文献書誌] Shinoura N,Yoshida Y,Nishimura M,Muramatsu Y,Asai A,Kirino T,Hamada H: "Expression level of Bcl-2 determines anti-or proapoptotic function"Cancer Res. 59. 4119-4128 (1999)
• [文献書誌] Shinoura N,Yoshida Y,Asai A,Kirino T,Hamada H: "Relative level of expression of Bax and Bcl-XL determines the celluar fate of apoptosis/necrosis induced by the overexpression of Bax"Oncogene. 18. 5703-5713 (1999)
• [文献書誌] Shinoura N,Muramatsu Y,Nishimura M,Yoshida Y,Saito A,Yokoyama T,Fukukawa T,Horii A,Hashimoto M,Asai A,Kirino T,Hamada H: "Adenovirus-mediated transfer of p33INGl with p53 drastically augments apoptosis in glimas"Cancer Res. 59. 5521-5528 (1999)
• [文献書誌] Asai A,Qiu J-h,Narita Y,Chi S,Saito N,Shinoura N,Hamada H,Kuchino Y,Kirino T: "High-level calcineurin activity predisposes neuronal cells to apoptosis"Jpn Biol Chem. 274. 34450-34458 (1999)
• [文献書誌] Nagane M,Asai A,Shibui S,Oyama H,Nomura K,Kuchino Y: "Expression pattern of chemoresistance-related genes in human maglinant brain tumors : a working knowledge for proper selection of anticancer drugs"Jpn J Clin Oncol. 29. 527-534 (1999)
• [文献書誌] Ueki K,Chen W-B,Narita Y,Asai A、Kirino T: "Tight association of loss of merlin expression with loss of heterozygosity at chemosome 22q in spoardic meningiomas"Cancer Res. 59. 5995-5998 (1999)