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1998 年度 実績報告書

脳腫瘍の特異的標的化を目指した遺伝子治療のベクター開発

研究課題

研究課題/領域番号 10470298
研究機関(財)癌研究会

研究代表者

濱田 洋文  癌研究会, 癌化学療法センター分子生物治療研究部, 部長 (00189614)

キーワード脳腫瘍 / 遺伝子治療 / アデノウイルスベクター / アデノウイルス ファイバー / EIA / アポトーシス / p53 / Bax
研究概要

1. グリオーマのアポトーシス:アポトーシス関連遺伝子を組み込んだアデノウィルスベクターを用いてグリオーマ細胞株に遺伝子導入し、導入量と細胞死との関連を調べた。その結果、グリオーマに対して、顕著な殺細胞効果を示したのは、Fas ligand、Fas、FADD、caspase-8、Bax、p53であった。著明な併用効果がみられたのは、p53とFas ligand、p53とp33、Baxとcaspasc-8、TNFとIkBの併用であった。
2. ファイバー・ノブ変異体アデノウイルスベクターAdV-F/K20を用いたグリオーマに対する遺伝子治療の検討:細胞側の受容体分子との吸着を担うファイバー・タンパクに変異を導入することによって、癌細胞の特異的標的化が可能な変異型アデノウイルスベクターを作製するシステムを確立した。特に、ファイバーのC末端にリジン20個の挿入変異を入れたアデノウイルスベクターAdv-F/K20は、グリオーマ細胞に対し従来の野性型アデノウイルスベクターAdV-F/wtに比べ数十倍も高い導入効率が得られた。このAdv-F/K20を用いてグリオーマの遺伝子治療法の開発を目指した基礎的検討を行った。(1)グリオーマ細胞において、サイトカイン(IL-2,IL-12)の産生量を測定したところ、F/K20による産生量はF/wtに比べ数十倍高い値を示した。(2)グリオーマ細胞での野性型p53遺伝子導入による効果をAxCAhp53-F/wtとAxCAhp53-F/K20で比較検討した。AxCAhp53-F/K20感染細胞は、AxCAhp53-F/wt感染細胞に比べ、p53タンパクの発現増加と著明な殺細胞効果の増強を認めた。(3)p53に変異を持つ細胞で増殖可能なE1B55Kを欠失したアデノウイルスAxE1AdBの殺細胞効果をAxE1AdB-F/wtとAxE1AdB-F/K20を用いて比較検討した。その結果、AxE1AdB-F/K20は、AxE1AdB-F/wtに比べて強い殺細胞効果を示した。これらの結果より、グリオーマの遺伝子治療においてAdv-F/K20はAdv-F/wtに比べ格段に有用性が増している事が示された。今後、F/K20を用いて脳腫瘍に対する臨床治療研究を準備してゆきたい。

  • 研究成果

    (20件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (20件)

  • [文献書誌] Shibagaki,N., Hanada,K., Yamaguchi,S., Yamashita,H., Shimada,S.and Hamada,H.: "Functional analysis of CD82 in the early phase of T cell activation : roles in cell adhesion and signal transduction." Eur.J.Immunol.28(4). 1125-1133 (1998)

  • [文献書誌] Kanai,F., Kawakami,T., Hamada,H., Sadata,A., Yoshida,Y., Tanaka,T., Ohashi,M., Tateishi,K., Shiratori,Y., and Omata,M.: "Adenovirus-mediated transduction of Escherichia coli uracil phosphoribosyltransferase gene sensitizes cancer cells to low concentration of 5-fluorouracil." Cancer Res.58. 1946-1951 (1998)

  • [文献書誌] Shiratori,Y., Kanai,F., Hikiba,Y., Moriyama,H., Hamada,H., Matsumura,M., Tanaka,T., Lan,K-H., Ohashi,M., Naito,M., and Omata,M.: "Gene therapy for hepatic micrometastasis of murine colon carcinoma." J.Hepatology. 28(5). 886-895 (1998)

  • [文献書誌] Ohashi,M., Kanai,F., Tanaka,T., Lan,K-H., Shiratori,Y., Komatsu,Y., Kawabe,T., Yoshida,H., Hamada,H., and Omata,M.: "In vivo adenovirus-mediated prodrug gene therapy for carcinoembryonic antigen-pro-ducing pancreatic cancer." Jp.J.Cancer Res.89. 457-462 (1998)

  • [文献書誌] Cao,X., Ju,D.W., Tao,Q., Wang,J., Wan,T., Wang,B.M., Zhang,W., and Hamada,H.: "Adenovirus-mediated GM-CSF gene and cytosine deaminase gene transfer followed by 5-fluorocytosine administration elicit more potent antitumor response in tumor-bearing mice." Gene Therapy. 5. 1130-1136 (1998)

  • [文献書誌] Nakazaki Y, Tani K, Lin Z-T, Sumimoto H, Hibino H, Izawa K, Hase H, Takahashi S, Tojo A, Azuma M, Hamada H, Mori S, and Asano S.: "Vaccine effect of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor or CD80 gene-transduced murine hematopoietic tumor cells and their co-operative enhancement of antitumor immunity" Gene Therapy. 5(10). 1355-1362 (1998)

  • [文献書誌] Nagasaka T, Hayashi S, Tachi Y, Liu D, koike C, Namii Y, Katayama A, Negita M, Kobayashi T, Hamada H, Yokoyama I, Takagi H.: "Inhibitory effect of alpha(1, 2)fucosyltransferase recombinant adenoviral vector on alpha Gal expression." Transplant Proc.30(7A). 3837-3838 (1998)

  • [文献書誌] Guang-Lin M, Hayashi S, Yokoyama I, Namii Y, Kobayashi T, Katayama A, Nagasaka T, Hamada H, Negita M, Takagi H.: "Adenovirus-mediated gene transfer of CTLA4IG gene results in prolonged survival of heart allograft." Transplant Proc.30(7). 2923-2924 (1998)

  • [文献書誌] Matsumoto,O., Sunamura,M., Shimamura,H., Kodama,T., Hashimoto,W., Kobari,M., Kato,K., Takeda,K., Yagita,H., Okumura,K., Hamada,H.and Matsuno,S.: "Adjuvant immunotherapy using genetically engineered interleukin 12 secreting fibroblasts prevents recurrence after surgical resection of established tumors in a murine adenocarcinoma model." Surgery. in press. (1999)

  • [文献書誌] Ohashi,M., kanai,F., Ueno,H., Tanaka,T., Kawakami,T., Koike,Y., Ikenoue,T., Shiratori,Y., Hamada,H.and Omata,M.: "In vivo adenovirus-mediated p53 gene therapy for gastric carcinoma in vitro and in vivo." Gut. in press. (1999)

  • [文献書誌] Inaba,M., Sawada,H., Sadata,A., and Hamada,H.: "In vitro circumvention of 5-fluorouracil resistance in human stomach cancer cells by adenovirus-mediated transduction of Escherichia coli uracil phophoribosyltransferase gene." Jp.J.Cancer Res.in press. (1999)

  • [文献書誌] Tanaka,H., Yoshizawa,H., Yamaguchi,Y., Ito,K., Kagamu,H., Suzuki,E., Hamada,H.and Arakawa,M.: "Successful adoptive immunotherapy of murine nonimmunogenic tumor with specific effector cells generated from gene-modified tumor-primed lymph node cells." J.Immunol.in press. (1999)

  • [文献書誌] Shinoura,N., Yoshida,Y., Sadata,A., Hanada,K., Yamamoto,S., Kirino,T., Asai,A., and Hamada,H.: "Apoptosis by retrovirus-and adenovirus-mediated gene transfer of Fas ligand to glioma cells : implication for gene therapy." Human Gene Therapy. 9(14). 1983-1993 (1998)

  • [文献書誌] Cao,X., Zhang,W., He,L., Xie,Z., Ma,S., Tao,Q., Yu,Y., Hamada,H.and Wang,J.: "Lymphotactin gene-modified bone marrow dendritic cells act as more potent adjuvants for peptide delivery to induce antitumor immunity." J.Immunol.161(11). 6238-6244 (1998)

  • [文献書誌] Yoshida,Y., Sadata,A., Zhang,W., Shinoura,N., and Hamada,H.: "Generation of fiber-mutant recombinant adenoviruses for gene therapy of malignant glioma." Human Gene Therapy. 9(17). 2503-2515 (1998)

  • [文献書誌] Shinoura,N., Ohashi,M., Yoshida,Y., Asai,A., Kirino,T., Saito,I., and Hamada,H.: "Construction, propagation, and titer estimation of recombinant adenoviruses for proapoptotic genes." Human Gene Therapy. 9(18). 2683-2689 (1998)

  • [文献書誌] Mano Y, Ishii M, Kisara N, Kobayashi Y, Ueno Y, Kobayashi K, Hamada H., Toyota T.: "Differentiated phenotypes of cultured mouse cholangiocytes transformed by a temperaturesensitive mutnat T antigen of Simian virus 40." Lab.Invest.78(11). 1467-1468 (1998)

  • [文献書誌] Yasuda H, Nagata M, Arisawa K, Yoshida R, Fujihira K, Okamoto N, Moriyama H, Miki M, Saito I, Hamada, H., Yokono K, Kasuga M.: "Local expression of immunoregulatory IL 12p40 gene prolonged syngeneic islet graft survival in diabetic NOD mice." J.Clin.Invest.102(10). 1807-1814 (1998)

  • [文献書誌] Ichikawa,T., Tamiya,T., Adachi,Y., Ono,Y., Matsumoto,K., Furuta,T., Yoshida,Y., Hamada,H.and Ohmoto,T.: "in vivo efficacy and toxity of 5-fluorocytosine/cytosine deaminase gene therapy for malignant gliomas mediated by adenovirus." Cancer Gene Therapy. in press. (1999)

  • [文献書誌] Zhang,W., He L., Yuan Z., Xie Z., Wang,J., Hamada,H., and Cao X.: "Enhanced therapeutic efficacy of tumor RNA-pulsed dendritic cells after-genetic modification with lymphotactin." Human Gene Therapy. 10(7)in press. (1999)

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公開日: 1999-12-11   更新日: 2016-04-21  

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