特異抗体を用いて同定した象牙芽細胞の防禦機構に関する電気生理学的・生化学的研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10470404
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 池田 英治 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (20222896)
• 研究分担者: 砂川 光宏 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 講師 (30179288) ; 須田 英明 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (00114760)
• キーワード: 象牙芽細胞 / Whole-cell patch-clamp / ナイスタチン / gap-junction / モノクローナル抗体 / 歯髄 / in-vitro免疫法 / dye-dunction

研究概要

1.in vitro免疫法
象牙芽細胞層には突起を有する細胞が多種存在するため,客観的に象牙芽細胞を同定できなかった.そこで申請者等はin vitro免疫法で抗ネコ象牙芽細胞モノクローナル抗体を生成し,象牙芽細胞を単離細胞中あるいは組織切片において免疫組織学的に同定した.
2.ナイスタチンを用いたwhole-cell patch-c1amp法
以上のように同定した象牙芽細胞であるが微小なために,ガラス微小電極の挿入が不可能であった.この点を、ナイスタチンを用いたwhole-cell patch-c1amp法を用いイオンチャンネルレベルで記録可能にした.象牙芽細胞膜に存在する非電位依存性チャンネルの種類、密度、機能が明らかにし,同細胞に電位依存性チャンネルはなく,この細胞が受容器として機能している証拠は認められなかった.
3.gap-junction
我々は象牙芽細胞と樹状細胞間のdye-couplingを証明し,それが電子顕微鏡学的にgap-junctionであることを証明した.これにより象牙芽細胞は神経系を介さずにgap-junctionを通じて情報を他の細胞に伝達している可能性が示された.

研究成果

• [文献書誌] H.Ikeda,H.Suda: "Dye-coupling between odontoblasts and other pulpal cells"J.dent,Res.. 77. 335-335 (1998)
• [文献書誌] H.Ikeda,H.Suda: "Sensacion subjetiva y deschargas nerviosas objetivas registradas en dientes clinicamente no vitales e intactos"Endodontica. 16・4. 225-233 (1998)
• [文献書誌] H.Ikeda et al.: "Nystatin Perforated Whole-cell Recording s from Immunocytochemically Identified Feline Odontoblasts"J.dent.Res.. (In press).
• [文献書誌] H.lkeda,H.Suda: "Subjective Sensation and Objective Neural Discharges Recorded from Clinically Nonvital and Intact Teeth"J.Endodont.. 24・8. 552-556 (1998)
• [文献書誌] H.Ikeda et al.: "Monoclonal antibodies to cat odontoblasts raised invitro immunisation"Cell Tissue Res. (In press).
• [文献書誌] H.Ikeda,H.Suda: "Lucifer Yellow passes through dye-coupling between odontoblasts and other pulpal cells"(In press).
• [文献書誌] H.Ikeda et al.: "Neurobiology of Mastication-from molecular to systems approach-"Elsevier Science B.V.. 79-82 (1999)
• [文献書誌] 池田英治,須田英明(分担): "エンドドンティクス21"永末書店. 404 (2000)