| 研究概要 |
A.癌抑制遺伝子機能を有するc-Myc結合タンパク質MM-1の機能解析
c-Mycの転写活性化領域に結合し,転写抑制するタンパク質としてcDNAクローニングしたMM-1(Mori et al.,JBC,1988)は全長163アミノ酸を有する.リンパ腫,白血病,扁平上皮癌由来の培養細胞,癌患者由来のMM-1は157番目のアミノ酸が,癌細胞由来のMM-1の33%でAla→Thr,Argに変異していた.正常MM-1によるc-MycのRasとの協調的細胞癌化,細胞増殖能の抑制を,この変異MM-1は解除することから,MM-1はtumor suppressorの可能性が示唆された.
B.c-Myc結合タンパク質AMY-1の機能解析
AMY-1はMM-1同様,c-Mycの転写活性化領域に結合し,転写促進するタンパク質としてcDNAクローニングした(Taira et al.,Gnes Cells,1998).AMY-1はK562細胞の分化誘導因子として機能したFurusawa et al.2000).更にAMY-1 transgenic miceはオスマウスの不妊を呈した.AMY-1結合タンパク質を更にスクリーニングしたところ,精子形成時に重要な機能を有するA-kinase Anchor protein84(AKAP-84)がクローニングされた.AMY-1はAKAP-84のRII domain(A-kinaseのregulatory subunit結合部位)に結合することから,A-kinaseの正常な局在性を阻害し,精子形成細胞のアポトーシス誘導を起こすことが推定された.更にAMY-1はアクチン重合に関与するWAVEに結合し,アクチン重合の場を変化させた.
C.c-MycのORC1,CDC6との結合によるクロマチンremodeling
c-MycはDNA複製因子として同定されているORC1,CDC6と結合することが判明した.ORC1はクロマチンremoodeling因子で,c-Mycの転写能を活性化するSNF5と拮抗的にc-Mycに結合し,c-Mycをクロマチンから解離させ,転写抑制することが判明した(Takayama et al.2000).同様な効果はCDC6でも観察された.
D.c-Myc結合タンパク質MSSPノックアウトマウスの作成
MSSPノックアウトマウスは出生する子マウス数が極端に少ないことから,MSSPの発生段階で重要な寄与が示唆された.
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