補体研究の新展開一免疫細胞の機能調節と不要自己細胞認識の分子機構

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10470478
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 長澤 滋治 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 教授 (70029958)
• 研究分担者: 瀬谷 司 大阪府立成人病センター研究所, 研究担当 (10301805) ; 村上 祐介 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助手 (10250466) ; 山下 俊之 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 講師 (90192400) ; 高橋 和彦 北海道大学, 大学院・薬学研究科, 助教授 (10113581)
• キーワード: 補体 / 免疫 / アポトーシス / MCP / 麻疹ウイルス

研究概要

本年度の主な研究成果は、
1; アポトーシス細胞の自己補体活性化分子の解析
アポトーシス死したヒトTリンパ球(Jurkat細胞)のNP40可溶化画分をSDS-PAGEし、PVDF膜に転写してからヒト血清で処理すると、50kDaの蛋白質に袖体C3が結合する事が見いだされた。これは、50kDaの分子力が自己補体を活性し、C3がその分子表面に結合したことを意味する。この50kDa分子をクロマトグラフィーで精製し、その末端分析を行ったところ、転写開始因子、INFであることが判明した。INFに対する抗体を用いたウエスタンプロットからも、50kDa分子がINFであることが確認された。同種補体を活性化しないヒト好中球では、抗INF抗体を用いたウエスタンブロットが陰性であり、INFが自己補体活性化分子である可能性を強く示唆する。
2; 新助界サルのMCP
MCPは補体制御因子であるほかに麻疹ウイルスレセプターでもある。麻疹は霊長類に感染するが、サルMCPの分子的な特徴は明らかでなかった。ヒトに近い旧世界サルに属するアフリカミドリサルの培養細胞Vero細胞ならびに新世界サルに属するマーモセットの培養細胞B95aかMCP遺伝子をクローニングし、ヒトMCPとの構造的な比較を行った。ヒトと近縁のVero細胞のMCPはヒトMCPと高い相同性を示し、麻疹ウイルス感受性も高いが、B95a細胞のMCPは麻疹感受性を示さなかった。B95a自体は麻疹疹ウイルス感受性を示すところから、MCP以外のウイルス受容体の存在する可能性を示唆する。

研究成果

• [文献書誌] Yusuke Murakami,et al.: "Molecular cloning of membrane cofactor protein(MCP)on B95a cell,an Epstein-Barr virus-transformed marmoset B cell line" Biochem.J.330. 1351-1359 (1998)
• [文献書誌] Tsukasa Seya et al.: "CD46(membrane cofactor protein of complement,measles virus receptor);structural and functional devergence among species." Int.J.Molec.Med.1. 809-816 (1998)
• [文献書誌] Yusuke Murakami et al.: "Effect of mutations at the residues R25,D27,P69,and N70 of B95a-MCP on receptor activities for MV" Int.J.Molec.Med.3. 25-32 (1999)
• [文献書誌] Shoki Mikata et al.: "A monomeric human C46-binding protein(C4bp)more efficiently inactivates C3b than natural C4bp;participation of C-terminal domains." Molec.Immunol.35. 537-544 (1998)