イネのエンハンサートラップ系統の作出と変異体解析

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10556003
• 研究機関: 国立遺伝学研究所
• 研究代表者: 倉田 のり 国立遺伝学研究所, 系統生物研究センター, 助教授 (90178088)
• 研究分担者: 野々村 賢一 国立遺伝学研究所, 実験圃場, 助手 (10291890) ; 伊藤 幸博 国立遺伝学研究所, 系統生物研究センター, 助手 (70280576)
• キーワード: エンハンサートラップ / イネ / Ac / Dsトランスポゾン

研究概要

平成11年度においては、Ds-GUSを1コピーおよび2コピー持つ形質転換体の自殖後代の中から、挿入Ds-GUSをホモに持つ個体5系統を選別した。同様に選抜したAc-transposaseの挿入7系統のホモ個体と、それぞれを相互交配し、合計27組み合わせについて交配種子を得た。これらを順次栽培し、F1個体でDs-GUSの転移する頻度を、組み合わせ毎に5個体以上のF2個体からDNAを抽出し、Ds-GUS excisionの頻度としてPCRで検定した。この結果現在までに以下の結果を得ることが出来た。
(1)調査した17組み合わせ(Ds-GUS4系統x Ac-transposase6系統の一部)において、全くexcisionの観察出来なかったものが9組み合わせあり、この中で6組み合わせは単一のDs-GUS系統に由来するものであった。またAc-transposase系統のうち1系統についても、どのDs-GUSとの組み合わせでも後代でのexcisionが見られなかった。
(2)2つのDs-GUS系統に由来する後代では、組み合わせのAc-transposase系統がかわっても、頻度高くDs-GUS excisionが起こることがわかった。残り1系統のDs-GUS後代では、低頻度の切り出しが見られた。
現在Ds-GUSの切り出しが見られた個体を用いて、再挿入が起こっているかどうか、起こる頻度はどのくらいか、再挿入と切り出し前の染色体上の位置関係は遠いか近いか、切り出し後に生成するクロロスルフロン耐性遺伝子が機能するか、それをエンハンサートラップラインの選抜に使えるか、などについて順次解析を行う準備を進めている。

研究成果

• [文献書誌] Nonomura, K.I. And Kurata, N: "Organization of 1.9-kb repeat unit RCE1 in the centromeric region of rice chromosomes"Molecular and General Genetics. 261. (1999)
• [文献書誌] Ito, Y., Eiguchi, M. and Kurata, N.: "Expression of novel homeobox genes in early embryogenesis in rice"Biochim. Biophys. Acta. 1444. 445-450 (1999)
• [文献書誌] Ashikawa, I., Kurata, N. et al.: "Application of restriction fingerprinting with a rice microsatellite sequence to assembling rice YAC clones"Genome. 42. 330-337 (1999)
• [文献書誌] Sentoku, N. et al.: "Regional expression of the rice KN1-type homeobox gene family during embryo, shoot and flower development"The Plant Cell. 11. 1651-1664 (1999)
• [文献書誌] Miyoshi, K and Kurata, N.: "Cloning of two cDNAs encoding the HAP3 subunit protein from developing rice seeds"Rice Genetics Newsletter. 15(in press). (1999)