| 研究課題/領域番号 |
10557097
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| 研究機関 | 杏林大学 |
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研究代表者 |
細山田 真 杏林大学, 医学部, 助手 (00291659)
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| 研究分担者 |
遠藤 仁 杏林大学, 医学部, 教授 (20101115)
金井 好克 杏林大学, 医学部, 助教授 (60204533)
武田 理夫 杏林大学, 医学部, 講師 (40255401)
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| キーワード | トランスポーター / 有機酸 / 培養細胞 / hOAT1 / 腎臓 |
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| 研究概要 |
1.ヒト型血管側有機酸トランスポーター(hOAT1)安定発現細胞株の作出。
前年度は輸送活性の高い細胞を得るために温度感受性SV40大形T抗原遺伝子トランスジェニックマウスより樹立したマウス近位尿細管S2セグメント由来株化細胞を用いてhOAT1安定発現細胞株を樹立した。この細胞はパラアミノ馬尿酸に対してKmは73.1±7.0μM、Vmaxは1736±19pmol/mg/minと強い輸送活性を示したが、極性が失われているために一方向性輸送は認められなかった。
従って今年度は一方向性輸送を示す細胞株を得るために、細胞極性の保たれているMDCK細胞を用いてhOAT1安定発現細胞株を樹立した。
2.ヒト型管腔側有機酸トランスポーター遺伝子のクローニング。
hOAT1ファミリーの中のhOAT4は管腔側に局在し、パラアミノ馬尿酸輸送活性を示すところから、分泌経路の出口のトランスポーターとして働く可能性が高い。hOAT1-hOAT4共発現細胞については今後作成する予定である。
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