| 研究課題/領域番号 |
10557223
|
|---|
| 研究機関 | 静岡県立大学 |
|---|
研究代表者 |
三輪 匡男 静岡県立大学, 薬学部, 教授 (10046287)
|
|---|
| 研究分担者 |
林眞 知子 静岡県立大学, 薬学部, 助手 (50137072)
前田 利男 静岡県立大学, 薬学部, 助教授 (00137069)
菅谷 純子 静岡県立大学, 薬学部, 講師 (30098131)
|
|---|
| キーワード | PAF / PAFアセチルヒドロラーゼ / 遺伝素因 / 腎不全 |
|---|
| 研究概要 |
炎症・アレルギー反応に関わる重要なメディエーターであるPAFはPAFアセチルヒドロラーゼ(PAF-AH)により分解されその活性を失い、PAF-AHが生体内の作用発現に極めて重要な働きを持つことが推察される。申請者らは先天性PAF-AH欠損家系を初めて発見するとともに、この酵素欠損が代表的アレルギー疾患である小児喘息の遺伝素因であることを報告している。米国の研究グループからこの酵素蛋白質(46k)のcDNA塩基配列が報告されているが、申請者らはSDSポリアクリルアミド電気泳動法とPAF-AH活性染色法を組み合わせた新規な手法を用いてヒト血漿中には約10kに相当する糖鎖と36kの蛋白質で構成された糖蛋白質であるPAF-AHの存在を証明することが出来た(業績2)。ヒト血漿30lから分離したこの糖蛋白質型PAF-AHの遺伝子情報を得る為にABIプロテインシーケンサーを用いてN末端アミノ酸配列の解析を進めたが、精製酵素蛋白質が極めて微量であったことから、さらに50lの血漿から精製を進めている。一方46k PAF-AHの点変異DNA情報(G994T)を基にステロイド反応性小児腎不全(SRNS)患者の白血球からDNAを抽出し、SepaGeneキットで精製し、PCR法で変異遺伝子の解析を進めた結果、この異常遺伝子(G994T)を持つ患者は対照群(G994G)と比較し再発率が有意に高いことを報告することが出来た(業績3)。この結果はPAFが腎臓疾患にもメディエーターとして機能し、その消去酵素の活性レベルが発症・進展に関わっていることを示唆する結果を得ることが出来た。
|
