1999 年度実績報告書

レトロウイルスライブラリーを利用した新しい発現クローニング法の開発とその応用

研究課題

研究課題/領域番号	10559006
研究機関	東京大学
研究代表者	北村俊雄東京大学, 医科学研究所, 客員教授 (20282527)
研究分担者	野坂哲哉東京大学, 医科学研究所, 客員助教授 (30218309)
キーワード	GFP / シグナルシークエンストラップ / サイトカイン / サイトカインレセプター / TNFレセプター / 転写因子
研究概要	研究代表者らが開発し、1995年に発表したレトロウイルスライブラリーを利用した発現クローニング法は、応用範囲が広く種々の実験に利用できる。今回のプロジュクトでは、1)GFPとのcDNAの融合ライブラリーを作成し、蛋白質の細胞内局在によって遺伝子を同定する方法(FL-REX)および2)レトロウイルスcDNAライブラリーを利用したシグナルシークエンストラップ法(SST-REX)を開発して新規遺伝子をスクリーニングしている。FL-REX法では主に転写因子、SST-REX法ではサイトカインおよびサイトカインレセプターを探索してる。現在までのところ、FL-REX法により胎児肝細胞からZinc Finger型の新規転写因子を1つ、SST-REX法により、TH2細胞から新規サイトカインレセプター、神経細胞から新規TNFレセプター、胎生期AGM領域(Aorta gonado mesonephros)からサイトカイン様分子cDNAを同定し、現在解析中である。今後レセプターのリガンドのクローニングを行いレセプターの細胞内での作用を明らかにしていきたい。新規サイトカインレセプターδ1、AGM由来のサイトカイン様分子TSGに関してはノックアウトマウスも併せて作成中である。

研究成果
(9件)

すべてその他

すべて文献書誌 (9件)

[文献書誌] Yang,Y-L.: "Receptors for polytropic and xenotropic murine leukemia viruses encoded by a single gane at Rmc1"Nature Genetics. 21. 216-219 (1999)
[文献書誌] Nosaka,T.: "Identification and characterizarion of constitutively active STAT5"Molecular Biology of Hematopoiesis 6. 277-287 (1999)
[文献書誌] Kojima,T.: "A novel signal sequence trap method using retrovirus-mediated gene transfer"Nature Biotechnol.. 17. 487-490 (1999)
[文献書誌] Nosaka,T.: "STAT5 as a molecular regulator of proliferation,differentiation,and apoptosis in hematopoietic cells"EMBO J.. 18. 4754-4765 (1999)
[文献書誌] Kitamura,T.: "Isolation of cDNAs for T cell antigens by retrovirs-mediated expression cloning"T Cell Protocols,Methods in Molecular Biology.. 143-152 (2000)
[文献書誌] Fujio,K.: "Molecular cloning of a novel type I cytokine receptor"Blood. (in press). (2000)
[文献書誌] Misawa,K.: "Molecular cloning and tissue distrubution of a mouse homologue of human LIGHT,a member of TNF super family"Cytogenetics and Cell Genetics. (in press). (2000)
[文献書誌] Misawa,K.: "A novel method to identify cDNAs based on localization of the GFP-fusion products"Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.. (in press). (2000)
[文献書誌] Morita,S: "An efficient and stable retrovirus packaging system for transient packaging"Gene Therapy. (in press). (2000)

1999 年度 実績報告書

レトロウイルスライブラリーを利用した新しい発現クローニング法の開発とその応用

研究代表者

北村 俊雄 東京大学, 医科学研究所, 客員教授 (20282527)

研究成果

[文献書誌] Yang,Y-L.: "Receptors for polytropic and xenotropic murine leukemia viruses encoded by a single gane at Rmc1"Nature Genetics. 21. 216-219 (1999)

[文献書誌] Nosaka,T.: "Identification and characterizarion of constitutively active STAT5"Molecular Biology of Hematopoiesis 6. 277-287 (1999)

[文献書誌] Kojima,T.: "A novel signal sequence trap method using retrovirus-mediated gene transfer"Nature Biotechnol.. 17. 487-490 (1999)

[文献書誌] Nosaka,T.: "STAT5 as a molecular regulator of proliferation,differentiation,and apoptosis in hematopoietic cells"EMBO J.. 18. 4754-4765 (1999)

[文献書誌] Kitamura,T.: "Isolation of cDNAs for T cell antigens by retrovirs-mediated expression cloning"T Cell Protocols,Methods in Molecular Biology.. 143-152 (2000)

[文献書誌] Fujio,K.: "Molecular cloning of a novel type I cytokine receptor"Blood. (in press). (2000)

[文献書誌] Misawa,K.: "Molecular cloning and tissue distrubution of a mouse homologue of human LIGHT,a member of TNF super family"Cytogenetics and Cell Genetics. (in press). (2000)

[文献書誌] Misawa,K.: "A novel method to identify cDNAs based on localization of the GFP-fusion products"Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.. (in press). (2000)

[文献書誌] Morita,S: "An efficient and stable retrovirus packaging system for transient packaging"Gene Therapy. (in press). (2000)

1999 年度実績報告書

北村俊雄東京大学, 医科学研究所, 客員教授 (20282527)