| 研究課題/領域番号 |
10650764
|
|---|
| 研究機関 | 早稲田大学 |
|---|
研究代表者 |
平田 彰 早稲田大学, 理工学部, 教授 (00063610)
|
|---|
| 研究分担者 |
村上 義彦 日本学術振興会, 特別研究員 (00339748)
常田 聡 早稲田大学, 理工学部, 専任講師 (30281645)
|
|---|
| キーワード | 水性二相分配系 / 蛋白質加水分解 / トウモロコシ蛋白質 / 生理活性ペプチド / 抽出反応 / ACE阻害ペプチド / プロテアーゼ / 天然蛋白質 |
|---|
| 研究概要 |
本研究では、(1)原料蛋白質としてトウモロコシ蛋白質(zein)を取り扱い、蛋白質加水分解酵素を用いた加水分解反応によって、所望の抗圧ペプチド(昇圧系酵素であるアンジオテンシン変換酵素の阻害ペプチド)の選択的生成を制御する事、及び(2)酵素反応系として水溶性ポリマーが形成する水性二相抽出法を利用することによって、分離・精製工程の簡略化を達成し得るプロセスを構築する事、を目的に研究を行い、以下の成果を得た。
1. 最適加水分解酵素の探索
α-chymotrypsin、papain、thermolysin等の蛋白質分解酵素を用い、水ー相系においてzeinの加水分解実験を行った所、疎水性アミノ酸への特異性が高いthermolysinを用いた場合に最も高い分解率が得られた。
2. 反応媒体の検討
thermolysinを用いた水性媒体中におけるzein加水分解率は、若干2%であった。しかし反応媒体中に水溶性有機溶媒を添加し、zeinの溶解度を増大させることによって、20wt%近い分解率が得られた。又、水溶性有機溶媒を添加した水性二相分配系においては30wt%近い高い分解率が得られた。
3. 水性二相分配系における蛋白質、限定加水分解物、低分子量ペプチドの分配挙動
ポリエチレングリコール(PEG)-デキストラン(DEX)二相系においてzein、限定加水分解物、低分子量ペプチド、及びthermolysinの分配比を測定した所、疎水性蛋白質であるzeinは選択的に上相(PEG-rich相)へ、低分子量ペプチドは下相(DEX-rich相)へ選択的に分配する事が判った。又、限定加水分解物は両相へほぼ等しく分配した。
4. ペプチド群のACE阻害能の測定
生成したペプチド群の生理活性を測定した結果、下相に選択的に分配した低分子量ペブチド群のACE阻害能がnative zeinよりも強くなっている事が判った。
|
