2001 年度実績報告書

がん細胞の分化に伴うエンドセリン受容体の発現調節機構

研究課題

研究課題/領域番号	10670084
研究機関	鳥取大学
研究代表者	二宮治明鳥取大学, 医学部, 助教授 (80212124)
キーワード	コレラ毒素 / ニーマンピック / エンドセリン
研究概要	CHO細胞において、ET-1/ETA complexはclathrin-coated pitsとcaveolaのいずれの経路でもinternalizeされうること、細胞表面のcholesterol量がその経路の選択を決定する要素のひとつであること、に関連して、細胞表面のcholesterol量の調節に関与する蛋白質Niernann-Pick C1(NPC1)の機能解析を行った。具体的には、GM1に結合するコレラ毒素(cholera toxin ; CT)をプローブとし、NPC1欠損CHO細胞(CHO^<npc1(-)>)におけるFITC標識CTの蓄積部位を解析した。さらに、^<125>I-CTの細胞内での代謝を、wild-typeの細胞と比較検討した。CHO^<npc1(-)>では、CTを取り込んだvesicleが細胞質周辺部に多数認められた。このveslcleは、抗GM1、抗Rab5陽性、抗Lamp2陰性であり、lysotrackerで標識されなかった。また、CTの代謝をwild typeの細胞と比較すると、CHO^<npc1(-)>では細胞内に取り込まれた^<125>I-CTのclearanceが遅延しており、その遅延はintact formのCTが細胞外へ排出される量の減少と対応していた。その結果、CHO^<npc1(-)>ではwild typeと比較して毒素活性を持つCT-Aサプユニットが多く産生され、細胞内cAMP濃度の上昇が見られた。さらに、機能を消失した変異NPC1を発現させると、CTを取り込んだvesicleに局在した。以上の結果は以下の事を示唆する。(1)NPC1欠損細胞においてGM1はearly endsomeに蓄積する、(2)GM1の:蓄積は、early endoso meからのrecyclingが遅延することによる、(3)NPC1は、late endsomeからのcholesterol outflowに関わることに加えて、carly cndosomcからのGM1 outflowに直接に関わる。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Hosokawa et al.: "Vascular endothelial cells that express dystroglycan are involved in angiogenesis."J. Cell Sci.. (in press). (2002)
[文献書誌] Sugimoto et al.: "Accumulation of cholera toxin and GM1 ganglioside in the early endosome of Niemann-Pick C1-deficient cells"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98. 12391-12396 (2001)
[文献書誌] Taniguchi et al.: "Sites and temporal changes of gangliosides GM1/GM2 storage in the Niemann-Pick disease type C mouse brain"Brain Dev.. 23. 414-421 (2001)
[文献書誌] Yamada et al.: "Progressive cell loss in the ventral posterior lateral and medial nuclei of thalamus in Niemann-Pick disease type C mice brain"Brain Dev.. 23. 288-297 (2001)
[文献書誌] Higaki et al.: "Isolation of NPC1-deficient Chinese hamster ovary cell mutants by gene trap mutagenesis"J. Biochem. 129. 875-880 (2001)
[文献書誌] Sawamura et al.: "Site-specific phosphorylation of tau accompanied by activation of mirogen-activated protein kinase (MAPK) in brains of Niemann-Pick type C mice"J. Biol. Chem.. 276. 10314-10319 (2001)

2001 年度 実績報告書

がん細胞の分化に伴うエンドセリン受容体の発現調節機構

研究代表者

二宮 治明 鳥取大学, 医学部, 助教授 (80212124)

研究成果

[文献書誌] Hosokawa et al.: "Vascular endothelial cells that express dystroglycan are involved in angiogenesis."J. Cell Sci.. (in press). (2002)

[文献書誌] Sugimoto et al.: "Accumulation of cholera toxin and GM1 ganglioside in the early endosome of Niemann-Pick C1-deficient cells"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98. 12391-12396 (2001)

[文献書誌] Taniguchi et al.: "Sites and temporal changes of gangliosides GM1/GM2 storage in the Niemann-Pick disease type C mouse brain"Brain Dev.. 23. 414-421 (2001)

[文献書誌] Yamada et al.: "Progressive cell loss in the ventral posterior lateral and medial nuclei of thalamus in Niemann-Pick disease type C mice brain"Brain Dev.. 23. 288-297 (2001)

[文献書誌] Higaki et al.: "Isolation of NPC1-deficient Chinese hamster ovary cell mutants by gene trap mutagenesis"J. Biochem. 129. 875-880 (2001)

[文献書誌] Sawamura et al.: "Site-specific phosphorylation of tau accompanied by activation of mirogen-activated protein kinase (MAPK) in brains of Niemann-Pick type C mice"J. Biol. Chem.. 276. 10314-10319 (2001)

2001 年度実績報告書

二宮治明鳥取大学, 医学部, 助教授 (80212124)