1999 年度実績報告書

DMAHP/Six5遺伝子の機能と筋緊張性ジストロフィーへの関与

研究課題

研究課題/領域番号	10670143
研究機関	自治医科大学
研究代表者	川上潔自治医科大学, 医学部, 教授 (10161283)
キーワード	筋緊張性ジストロフィー / DMAHP / Six5遺伝子 / CTGリピート / 転写開始点 / 転写制御エレメント / 標的遺伝子 / Myogenin / Eya遺伝子
研究概要	DMAHP/Six5遺伝子が筋緊張性ジストロフィー(DM)の発症にいかに関与するのかを分子レベルで明らかにすることを最終目標として、次の点を明確にした。 (1)骨格筋、心筋、マウス胚でのSix5の転写開始点を同定し、各組織に共通の転写開始点2箇所と初期胚(E11)特異的な開始点を明らかにした。これらの開始点はいずれもCTGリピートの下流であり、転写されたmRNA中のCUGリピートによるスプライシングや翻訳の異常によって、DMの発症がおこる可能性が排除された。 (2)P19細胞におけるDMAHP/Six5遺伝子の転写制御エレメントを解析し、3箇所のSp1/Sp3が正の制御エレメントであること、他に2箇所の負の制御エレメントが存在し、そのうちの1箇所には特異的な因子が結合することを見い出した。 (3)DMAHP/Six5遺伝子産物によって制御される標的遺伝子群の同定のため、強力な転写活性化ドメインVP16および転写抑制化ドメインEngを融合させた活性化型Six5および抑制化型Six5を作成した。活性化型Six5はよく機能したが抑制化型は、期待した効果がみられなかった。現在、活性化型Six5をアデノウイルスに組み込み、P19細胞やC2C12細胞に感染させた結果誘導が見られる遺伝子をマイクロアレーにて同定している。 (4)Six1、Six4の標的遺伝子として同定されたMyogeninプロモーターはSix5によっても活性化される。SixのコアクチベータEyaのうちEya3とSix5の組み合わせが、Myogeninプロモーターを最も効率良く活性化した。このことは、Six5の発現低下により転写コアクチベータEyaとの共同作用が減弱し、Myogeninの発現低下をきたした結果筋肉の未成熟がおきるというDMの新たな発症機序の可能性を示唆するものである。

研究成果
(10件)

すべてその他

すべて文献書誌 (10件)

[文献書誌] Wendt,C.H.: "Regulation of Na-K-ATPase gene expression by hyperoxia in MDCK cells"Am.J.Phys.. 274. C356-C364 (1998)
[文献書誌] Shimomura,A.: "Dominant negative ATF1 blocks cAMP-induced neurite outgrowth in PC12D cells"J.Neurochem.. 70. 1029-1034 (1998)
[文献書誌] Ohto,H.: "Tissue and developmental distribution of Six family gene products"Int.J.Dev.Biol.. 42. 141-148 (1998)
[文献書誌] Muto,S.: "Transcriptional regulation of Na,K-ATPase gene expression by hyperosmolality in vascular smooth muscle cells"J.Membr.Biol.. 162. 233-245 (1998)
[文献書誌] Muto,S.: "Corticosterone and it's metabolite,11-dehydrocorticosterone,stimulate Na,K-ATPase gene expression in vascular smooth muscle cells"Kidney International. 54. 492-508 (1998)
[文献書誌] Kobayashi,M.: "Overexpression of the forebrain-specific homeobox gene six3 induces rostral forebrain enlargement in zebrafish"Development. 125. 2973-2982 (1998)
[文献書誌] Murakami,Y.: "Promoter of mDMAHP/Six5 : differential utilization of multiple transcription initiation sites and positive/negative regulatory elements"Hum.Molec.Genet.. 7. 2103-2112 (1998)
[文献書誌] Niiya,A.: "Localization of Six4/AREC3 in the developing retina ; implications in mammalian retinal development"Exp.Eye.Res.. 67. 699-707 (1998)
[文献書誌] Ohto,H.: "Cooperation of Eya and Six in transactivation of their target genes through nuclear translocation of Eya"Mol.Cell.Biol.. 19. 6815-6824 (1999)
[文献書誌] Ozaki,H: "Structure and chromosomal mapping of human SIX4 and mouse Six4 genes"Cytogenet.Cell Genet.. 87. 108-122 (1999)

1999 年度 実績報告書

DMAHP/Six5遺伝子の機能と筋緊張性ジストロフィーへの関与

研究代表者

川上 潔 自治医科大学, 医学部, 教授 (10161283)

研究成果

[文献書誌] Wendt,C.H.: "Regulation of Na-K-ATPase gene expression by hyperoxia in MDCK cells"Am.J.Phys.. 274. C356-C364 (1998)

[文献書誌] Shimomura,A.: "Dominant negative ATF1 blocks cAMP-induced neurite outgrowth in PC12D cells"J.Neurochem.. 70. 1029-1034 (1998)

[文献書誌] Ohto,H.: "Tissue and developmental distribution of Six family gene products"Int.J.Dev.Biol.. 42. 141-148 (1998)

[文献書誌] Muto,S.: "Transcriptional regulation of Na,K-ATPase gene expression by hyperosmolality in vascular smooth muscle cells"J.Membr.Biol.. 162. 233-245 (1998)

[文献書誌] Muto,S.: "Corticosterone and it's metabolite,11-dehydrocorticosterone,stimulate Na,K-ATPase gene expression in vascular smooth muscle cells"Kidney International. 54. 492-508 (1998)

[文献書誌] Kobayashi,M.: "Overexpression of the forebrain-specific homeobox gene six3 induces rostral forebrain enlargement in zebrafish"Development. 125. 2973-2982 (1998)

[文献書誌] Murakami,Y.: "Promoter of mDMAHP/Six5 : differential utilization of multiple transcription initiation sites and positive/negative regulatory elements"Hum.Molec.Genet.. 7. 2103-2112 (1998)

[文献書誌] Niiya,A.: "Localization of Six4/AREC3 in the developing retina ; implications in mammalian retinal development"Exp.Eye.Res.. 67. 699-707 (1998)

[文献書誌] Ohto,H.: "Cooperation of Eya and Six in transactivation of their target genes through nuclear translocation of Eya"Mol.Cell.Biol.. 19. 6815-6824 (1999)

[文献書誌] Ozaki,H: "Structure and chromosomal mapping of human SIX4 and mouse Six4 genes"Cytogenet.Cell Genet.. 87. 108-122 (1999)

1999 年度実績報告書

川上潔自治医科大学, 医学部, 教授 (10161283)