H.Pyloriと宿主細胞間の相互作用における細胞内シグナル伝達制御機構と病態

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10670148
• 研究機関: 福井県立大学看護短期大学部
• 研究代表者: 朝日 百百代 福井県立大学看護短期大学部, 助教授 (60100624)
• 研究分担者: 長井 幸史 福井医科大学, 医学部・生物学, 教授 (80135102) ; 東 健 福井医科大学, 医学部・第二内科, 講師 (60221040) ; 加藤 卓次 福井県立大学, 看護短期大学部, 教授 (70145902)
• キーワード: H.Pylori / MKN 45 cell / AGS cell / 蛋白質チロシンリン酸化 / 145kDa蛋白質

研究概要

1. 本研究は、H.pylori感染によるバクテリアと宿主細胞間の相互作用による細胞-細胞接着を伴った蛋白質リン酸化反応を介した細胞内シグナル伝達制御機構を解析することによって、H.pylori感染症における病態の分子機構を明らかにすることを目的としている。
2. 今回私たちは、H.pylori感染した胃粘膜上皮癌細胞株(MKN45cellsおよびAGS cells)において、2種のH.pylori標準株では145kDaの蛋白質が、8種の福井臨床株では130-135kDaの蛋白質がチロシンリン酸化されることをin vivoで見出した。このH.pylori菌種に依存した分子量の異なる蛋白質のチロシンリン酸化は、H.pyloriの各菌種と宿主細胞の1%NonidctP-40で可溶homogenatesをそれぞれin vitroでリン酸化反応させた再構成実験においても、in vivoで得られた結果と同様の145kDaおよび130-135kDaに相当する蛋白質のチロシンリン酸化の多様性が再現された(EHPG'98Workshopにて発表)。さらに、H.pyloriの標準株1種および臨床株2種の1%NP-40homogenatesを既存の精製された非受容体型のsrcチロシンキナーゼおよび受容体型のEGFレセプターチロシンキナーゼを用いてin viroでそれぞれリン酸化反応させたところ、いずれのキナーゼによっても145kDaおよび130-135kDaに相当する蛋白質のチロシンリン酸化が認められた。
3. H.pylori感染における145kDaのチロシンリン酸化蛋白質は、これまで「宿主細胞由来」と考えられていたが、今回私達が得たH.pylori菌種に依存した145kDaおよび新規な130-135kDaチロシンリン酸化蛋白質はH.pyloriの「基質蛋白質」であることを示唆しており、それらの蛋白質の精製および同定を行なう計画である。現在、"The Diverse Protein-Tyrosine Phosphorylation of
Bactcrial Substratcs Induced with Helicobacter pylori"で投稿準備中である。

研究成果

• [文献書誌] M.Asahi,T.Kato,S.Ito,T.Azuma,M.Aihara,Y.Tohyama,Y.Nagai: "“Diversity of protein-tyrosine phosphorylation induced with various strains of Helicobacter pylori infection in gastric cell lines" Gut. Vol.43(2). 30-30 (1998)
• [文献書誌] 朝日百百代: "「H.Pyloriの接着による胃癌細胞のチロシンリン酸化を抑制」" 日経CME. 11月別冊. 6-6 (1998)
• [文献書誌] Y.Tohyama,K.Tohyama,M.Tsubokawa,M.Asahi,Y.Yoshida,H.Yamamura.: "“Outside-in signaling of soluble and solid fibrinogen through integrin α IIbβ 3 is distin-guished and cooperative with each other in a mega karyoblastic leukemia cell line CMK"" Blood. Vol.92(4). 1277-1286 (1998)
• [文献書誌] N.Okishio,R.Fukuda,M.Nagai,Y.Nagai,S.Nagatomo,T.Kitagawa: "“Tyrosine Phosphorylation- induced changes in absorption and UV resonance Raman spectra of Src-peptides"" J.Raman Spectroscopy. 29. 31-39 (1998)
• [文献書誌] T.Azuma,S.Ito,F.Sato,Y.Yamazaki,H.Miyaji,Y.Ito,H.Suto,M.Kuriyama,T.Kato,Y.Kohli.: "“The role of the HLA-DQA1 gene in resistance to atrophic gastritis and gastric adenocarcinoma induced by Helicobacter pylori infection."" Cancer. 82. 1013-1018 (1998)
• [文献書誌] Y.Ito,T.Azuma,S.Ito,H.Suto,H.Miyaji,Y.Yamzaki,Y.Kohli,M.Kuriyama.: "“Full-length sequence analysis of the vacA gene from cytotoxic and noncytotoxic Helicobacter pylori."" J.Infectious Diseases. 178. 1391-1398 (1998)