線管分離法を用いた大腸癌の腫瘍内heterogeneityの解析

1999 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 10670171
• 研究種目: 基盤研究(C)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 人体病理学
• 研究機関: 岩手医科大学
• 研究代表者: 中村 眞一 岩手医科大学, 医学部, 教授 (20107816)
• 研究期間 (年度): 1998 – 1999
• キーワード: 腺管分離法 / 大腸癌 / 腫瘍内heterogeneity / microsatellite instability / MSH2 / Mismatch repair gene / LOH / Microsatellite instability

研究概要

大腸癌の癌化過程では家族性大腸腺腫症に代表される、APC遺伝子やK-ras遺伝子変異を伴う過程と、遺伝性非腺腫症性大腸癌(HNPCC)に代表されるミスマッチ修復(MMR)遺伝子変異により癌化が起る過程が存在する。MMR遺伝子異常が腫瘍全体の遺伝異常とどの様に関わっているかを解析した報告は現在までになされていない。そこでMMR遺伝子の異常と腫瘍内heterogeneityとの関係について評価した。散発性大腸癌46例の腺管分離材料を用い以下の如くDNA解析を行った。
1.MMR遺伝子(MSH2,MLH1)の点突然変異と遺伝子欠失(LOH)
2.癌抑制遺伝子p53遺伝子のLOH
3.DNA複製エラー(RER)の検索
4.MMR遺伝子の2ヒット症例では単一腺管ごとにDNAを抽出し、上記の遺伝子解析を行った。その結果は以下の如くであった。
1.MMR遺伝子のLOHはRER陽性癌で多く検出された。
2.MMR遺伝子は腫瘍内でheterogeneityを示した。これはp53遺伝子のLOHとは対照的であった。
3.MMR遺伝子の2ヒット症例の癌腺管は点突然変異のみを有する腺管群(1ビット)とLOHを伴う腺管群(2ヒット)とに分類され、腫瘍内heterogeneityの存在が腺管単位で証明された。
異常なMMR遺伝子の不活性化は抑制遺伝子のそれとは異なり、腫瘍内でheterogeneityを誘導するユニークな機構で癌化に寄与する可能性が考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Habano W, Sugai T, Nakamura S.: "Mismatch repair deficiency leads to a unique mode of colorectal tumorigenesis characterized by intratumoral heterogeneity"Oncogene. 16. 1259-1265 (1998)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Habano W, Nakamura S, Sugai T.: "Microsatellite instability in the mitochondrial DNA of colorectal carcinomas: Evidence for mismatch repair systems in mitochondrial genome"Oncogene. 17. 1931-1937 (1998)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Sugai T, Nakamura S, Habano W, Uesugi N, Sato H, Funato O, Sasou S, Orii S, Itoh C: "Analysis of subclonal expansion of colorectal carcinomas by flow cytometry"Virchows Arch. 434. 437-441 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Sugai T, Nakamura S, Habano W, Uesugi N, Sato H, Yoshida T, Orii S,: "Usefulness of proliferative activity, DNA ploidy pattern and p53 products as diagnostic adjuncts in colorectal adenomas and intramucosal carcinomas."Pathology International. 49. 617-625 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Sugai T. Nakamura S, Uesugi N, Habano W, Yoshida T, Tazawa H, Orii S, Suto T, Itoh C.: "Role of DNA aneuploidy, overexpression of p53 gene product, and cellular proliferation in the progression of gastric cancer"Cytometry. 38. 111-117 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Habano W, Sugai T, Yoshida T, Nakamura S.: "Mitochondrial gene mutation, but not large-scale deletion, is a feature of colorectal carcinomas with mitochondrial microsatellite instability"Int. J. Cancer. 83. 625-629 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [文献書誌] Kitayama Y, Nakamura S, Sugimura H, Kino I.: "Cytophotometric and flow cytometric DNA content of isolated glands in gastric neoplasia."Gut. 36. 516-521 (1995)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Habano W, Sugai T, Nakamura S, Yoshida T.: "A novel method for gene analysis of colorectal carcinomas using a crypt isolation technique."Lab Invest. 74. 933-940 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Yoshida T, Nakamura S, Sugai T.: "DNA ploidy and S-phase fraction of neoplastic and non-neoplastic lesions of the human gallbladder."J Surg Oncol. 63. 9-16 (1996)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Suto T, Sugai T, Nakamura S. Uesugi N, Sasaki R, Kanno S, Saito K: "Immunochemical detection of proliferative cell nuclear antigen and p53 expression in carcinoma of the extrahepatic bile duct."Oncology. 54. 407-413 (1997)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Suto T. Sugai T, Nakamura S, Funato 0, Nitta H, Sasaki R, Nanno S, Saito K: "Assessment of the expression of p53, NIB-1 (ki-67antigen) , and argyrophilic nucleolar organizer regions in carcinoma of the extrahepatic. Bile duct."Cancer. 82. 86-95 (1998)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Habano W, Sugai T, Nakamura S: "Mismatch repair deficiency leads to a unique mode of colorectal tumorigenesis characterized by intratumoral heterogeneity."Oncogene. 16. 1259-1265 (1998)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Sngai T, Habano W, Nakamura S, Yoshida T, Uesugi N, Suto T, Ito C: "Correlation of histologic morphology and tumor stage with molecular genetic analysis using microdissection in gastric carcinomas."Diagnostic Molecular Pathology. 7. 235-240 (1998)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Habano W. Nakamura S, Sugai T: "Microsatellite instability in the mitochondrial DNA of colorectal calcinomas: Evidence for mismatch repair systems in mitochondral genome"Oncogene. 17. 1931-1937 (1998)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Sugai T, Nakamura S, Habano W, Uesugi N, Sato H, Funato 0. Sasou S. Orri S. Itoh C: "Analysis of subclonal expansion of colorectal carcinomas by flow cytometry."Virchows Arch. 434. 437-441 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Sugai T, Nakamura S, Habano W, Uesugi N, Sato H, Yoshida T, Orri S: "Usefulness of proliferative activity, DNA ploidy pattern and p53 products as diagnostic adjuncts in colorectal adenomas and intramucosa1 carcinomas."Pathology International. 49. 617-625 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Sugai T, Nakamura S, Uesugi N, Habano W, Yoshida T, Tazawa H, Orri S. Suto T, Itoh C: "Role of DNA aneuploidy, overexpression of p53 gene product, and cellular proliferation in the progression of gastric cancer."Cytometry. 38. 111-117 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [文献書誌] Habano W, Sugai T, Yoshida T, Nakamura S: "Mitochondrial gene mutation, but not large-scale deletion, is a Feature of colorectal carcinomas with mitochondrial microsatellite instability."Int J Cancer. 83. 625-629 (1999)
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より