研究概要 |
最終年度にあたる本年は複雑で多様性のあるT-cellreceptor(TCR)β鎖の再構成を示すリンパ球を形態学的に同定するreverse transecriptase(RT)polymerase chain reaction(PCR)in situ法の完成を試みた.まず,菌状息肉症の新鮮凍結材料を用いて,RT-PCR法(Yumoto,et al:Restricted Vβ gene usage of tumor-infiltrat-ing T lymphocytes in primary gastric malignant B-cell lymphoma.Virchows Archiv 1995;426:11)により陽性バンドを確認し,そのバンドをゲルから切り出して,sequencingを行ない配列を決定した.その配列より改めてPCR用のprimerを決定し,さらにそのprimer間の配列からin situ hybridization用のprobeの配列を決定した.こうして改めて作成されたPCR用primerとin situ hybridization用のprobeを用いて,新鮮凍結材料を用いた同一症例のパラフィン切片にNuovoのプロトコール(PCR in situ hybridization:protocols snd applications.Third Ed,New York,Raven Press,1997)に則り,PCR-in situ法を行った.その結果,標本の荒廃が激しいものの一部の細胞に陽性所見が得られた. 上記研究と平行して,顔面に好発して組織学的に悪性リンパ腫との鑑別が問題とあることの多いpseudolymphomatous foliculitis(PLF)について,組織学的・免疫酵素組織化学的・分子遺伝学的検索を行い,activated pilosebaceous unitsとT-cell associated dendritic cellsの浸潤により他の疾患と明瞭に鑑別しうるcutaenous pseudolymphomaの1つのentityであることを明らかにした(Arai E,et al:Pseudolymphomatous folliculitis.A clinocopathologic study of 15 cases of cutaneous pseudolymhoma with follicular invasion.Am J Surg Pathol 23:1313,1999)
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