| 研究概要 |
日本人脳腫瘍患者由来DNA75例(上衣腫3例、乏突起膠腫9例、星細胞腫12例、退形成性星細胞腫11例、髄芽腫1例、膠芽腫39例)を用い、9番染色体短腕に存在するがん抑制遺伝子候補であるp16遺伝子の異常を検索した。まずp16遺伝子のホモ接合型欠失の有無を、p16遺伝子エクソン2および同じ9番染色体長腕に存在する9pSTS5を増幅する2種のプライマー系を用いたマルチプレックスPCR法により調べた。p16遺伝子のホモ接合型欠失は1例の退形成性星細胞腫と6例の膠芽腫においてのみ認められた。PCR-SSCP法によるp16遺伝子変異のスクリーニングでは星細胞腫の1例、退形成性星細胞腫の1例および膠芽腫の6例での移動度のことなるシグナルが見られた。この8症例のPCR産物をベクターに組み込み塩基配列を決定した。全例に突然変異が検出され、膠芽腫のの3例のコドン66,143,145にアミノ酸置換の予測される変異が見られた。抗p16抗体を用いた免疫染色法によりp16蛋白発現を検索した45症例(上衣腫1例、乏突起膠腫4例、星細胞腫5例、退形成性星細胞腫6例、膠芽腫29例)中70%異常の腫瘍細胞が反応陰性であった例は星細胞腫の1例、退形成性星細胞腫の2例、および膠芽腫の6例であり、その他の例でも反応陰性細胞のクローナルな増殖がしばしば認められた。また上衣腫の1例、膠芽腫の3例では部位による差が大きく、70%以上の腫瘍細胞が陽性の部位と陰性の部位が認められた。以上、悪性度の高い症例でp16遺伝子のホモ接合型欠失率、突然変異率、発現異常率のいずれも高かった。しかし悪性脳腫瘍においてはp16遺伝子のホモ接合型欠失が50%以上と高頻度に認められ、突然変異はほとんどみられないとする欧米からの報告とは異なり、本研究による日本人悪性脳腫瘍患者のp26遺伝子のホモ接合型欠失の頻度は約15%と低く、脳腫瘍発生機構に人種差がある可能性が示唆された。
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