急速進行性糸球体腎炎における半月体形成機序のモノクローナル抗体による解析

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10670197
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 折笠 道昭 新潟大学, 医学部, 助教授 (30185681)
• キーワード: モノクローナル抗体 / 半月体形成細胞 / 糸球体上皮細胞 / 糸球体腎炎 / マクロファージ様細胞

研究概要

昨年度、ラット糸球体培養で得られたマクロファージ様細胞を免疫抗原として作成したモノクローナル抗体OS-3がモデル腎炎での半月体に反応することを報告した。今回、さらに同時に作成した半月体反応性モノクローナル抗体OS-6も加えて免疫組織学的な解析を実施し、半月体形成機序とその構成細胞の同定を行った。
OS-3は培養糸球体細胞より発生したマクロファージ様細胞に反応するが、正常ラット腎のボーマン嚢上皮細胞の一部に陽性であった。また、OS-6は正常糸球体に存在するマクロファージに陽性であった。しかしながら、OS-3とOS-6はWKYラット馬杉腎炎モデルで形成される半月体に反応した。免疫電顕による半月体構成細胞の解析でOS-3はボーマン嚢上皮細胞のほかマクロファージ、さらに糸球体上皮細胞に陽性であった。また、蛍光抗体法二重染色による検索では糸球体上皮細胞に通常発現しているpodocalyxinがOS-3、OS-6反応細胞から消退することが観察された。
以上の結果より、馬杉腎炎モデルで形成される半月体はマクロファージとボーマン嚢上皮細胞さらには糸球体上皮細胞の複合体より構成されることが判明した。一方、OS-6が認識する分子はOS-3対応分子の分子量と異なり(OS-3対応分子43kD、OS-6対応分子160kD)、二重染色法でも一部共通部位に反応するものの、明らかにそれぞれ異なる部位への反応が認められた。
現在、それぞれのモノクローナル抗体により認識される抗原分子の遺伝子のクローニングを行い、さらに半月体形成過程の糸球体上皮細胞の"形質の変化"と培養糸球体上皮細胞の"化生"に至る過程を対比させ半月体の形成機序での糸球体上皮細胞の果たす役割を細胞生物学的に明確すべく実験を続行している。

研究成果

• [文献書誌] Li P., et al.: "Effect of Sairei-to on irreversible glomerular scleotic lesions in rats."Nephrology. 4. 49-56 (1998)
• [文献書誌] Kawase T., et al.: "Up-regulation of inducible nitric oxide (NO) synthase and NO production in HL-60 cells stimulated to differentiate by phorbol 12-myristate 13-acetate plus 1,25-dihydroxyvitamin D3 is not obtained with dimethyl-sulfoxide plus 1,25-dihydroxyvitamin D3."Calcif.Tissue Int.. 63. 27-35 (1998)
• [文献書誌] Yanase H.,et al.: "Immunohistochemical identification of type B intercalated cells in the rat kidney by a monoclonal antibody."Arch.Histol.Cytol.. 61. 111-121 (1998)
• [文献書誌] Kawase T., et al.: "Possible regulation of growth factor-receptor tyrosine autophosphorylation by calcium and G-proteins in chemically permeabilized rat UMR106 cells."Archiv. oral Biol.. 44. 157-171 (1999)
• [文献書誌] Shimizu F., et al.: "The role of mesangial cell damage in progressive renal disease."Kidney Blood Press Res. 22. 5-12 (1999)
• [文献書誌] Li P., et al.: "The prevention of glomerulosclerosis in rats using traditional Chinese medicine,Saire-to."Nephrology. (印刷中).
• [文献書誌] Kawachi H., et al.: "Cloning of rat nephrin: Expression in developing glomeruli and in proteinruric states."Kidney Int.. (印刷中).
• [文献書誌] Kikuchi H., et al.: "Sever proteinuria, sustained for six month, induces tubular epithelial cell injury and cell infiltration but not enough to induce progressive interstitial in rats."Nephrol.Dialysis Transplant.. (印刷中).