先天性トキソプラズマ症発症機序の解析

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10670225
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 矢野 明彦 千葉大学, 医学部, 教授 (20135122)
• 研究分担者: 畑 英一 千葉大学, 医学部, 助手 (00110304) ; 青才 文江 千葉大学, 医学部, 助教授 (80150316)
• キーワード: トキソプラズマ原虫 / 先天性トキソプラズマ症 / IFN-γ / IFN-γKO / 細胞傷害性T細胞 / 胎盤免疫 / HSP70 / 細胞内寄生原虫

研究概要

先天性トキソプラズマ症は最も悲惨なトキソプラズマ症である。本研究では、1)先天性トキソプラズマ症の動物モデルの確立、2)トキソプラズマ原虫の胎児への感染経路および感染成立機序の解析、3)トキソプラズマ原虫の毒性決定機序の解析、を研究目的とした。その結果、1)に関しては、a)妊娠マウスにトキソプラズマ原虫の経口感染で100%の胎児感染が得られる実験系を1FN-γKOマウスを用いて確立することに成功した。b)胎盤における抗トキソプラズマ原虫機序にトキソプラズマ原虫感染細胞特異的Tc1細胞が主要な役割を演じており、胎盤感染防御,のエフェクター分子がIFN-γであることが明らかになった。c)Tcl細胞が産生ずるIFN-γが流産因子として機能し、先天性トキソプラズマ症における流産の発症機序を明らかにした。d)その一方で、感受性決定機序にIFN-γ以外の遺伝子が関与していることが示された。今後、TNF-αKOマウスの導入により先天性トキソプラズマ症におけるより詳細な感染統御遺伝子の解析と遺伝子発現機序に関する研究を進める予定である。2)に関しては、a)経口感染したトキソプラズマ原虫は胎盤でIFN-γにより急増虫体から緩増虫体に分化することが示された。b)急増虫体の感染において、トキソプラズマ感染細胞に特異的な細胞障害性T細胞は標的細胞を破壊するがトキソプラズマ原虫を殺さないことを明らかにした。このことから、平成11年度では緩増虫体が感染した標的細胞特異的細胞傷害性T細胞の誘導機序およびトキソプラズマ原虫の胎児への感染機序における役割に関して解析を進める。3)の病原性決定遺伝子の解析では、a)我々がクローニングに成功したHSP70が毒性発現に関与していることをIFN-γKOマウスを用いたinvivoの実験で明らかにした。今後、HSP70の遺伝子発現機序に関して分子レベルで解析を進める予定である。

研究成果

• [文献書誌] Yang,T-H.,Aosal,F.,Norose,K.,Mun H-S.and Yano,A.: "Heat shock cognate protein 71-associated peptides function as an epitope for T.gondii-specific CD^<4+> CTL." Microbiol.Immunol.41(1). 553-561 (1997)
• [文献書誌] He N.,Aosai F.,Luo W.,Ueda M.,Yang T-H.,Yamashita K.,Souei Sekiya and Yano A.: "Parasite load in pregnant mice infected by Toxoplasma gondii assayedby quantitative competitive-PCR." Pasitol.Int.46. 143-147 (1997)
• [文献書誌] Yano A.,Aosai F.,Yang T-H.,He N.,Mun H-S.,Liu H.and Norose K.: "Correlation between direct binding ability of synthetic T.gondii SAG1 peptides to HLA-A2 measuredby a sensor for surface plasmon resonance and antigenicity of the peptides for T.gondii-infected cell-specific CTL." Bioch.Biophysic.Res.Commun.236. 257-261 (1997)
• [文献書誌] Luo W.,Aosai F.,Ueda M.,Yamashita K.,Shimizu K.,Sekiya S.and Yano A.: "Kinetics of changes in parasite load in susceptible and resistant mice infected with an avirulent strain of Toxoplasma godii by using quantitative competitive PCR." J.Parasitol.83(6). 1070-1074 (1997)
• [文献書誌] Yamashita,K.,Yui,K.,Ueda,M.,and Yano,A.: "CTL-mediated lysis of Toxoplasma-infected target cells does not lead to death of the intracellular parasites." Infect.Immun.60(10). 4651-4655 (1998)
• [文献書誌] Aosai F.,Hye-Seong Mun,Norose K.,Mei Chen.Hata H.,Kobayashi M.,Kiuchi M,Stauss H.J.,Yano A.: "Protective immunity induced by vaccination with SAG1-gene transfected cells against Toxoplasma gondii-infection mice." Microbiol.Immunol.43(3). 87-91 (1999)
• [文献書誌] A.Yano,H-S.Mun.T-H.Yang,H.Hata,M.Kobayashi,K.Norose,S.Hayakawa,Y.Tagawa,Y.Iwakura,S.Nakazaki,Y.Nakazaki,S.Sekiya,A.Yamaura,H.Kubosawa,N.Yumoto,F.Aosai.: "Roles of IFN-gamma in effector mechanisms and pathogenicity of HSPs in mice and human infected with Toxoplasma gondii.〔COPA〔X-9th International Congress of Parasitology,ed.Isao Tada,Somei Kojima,Moriyasu Tsuji." Blogna,Italy.Monduzzi Editore., 10 (1998)
• [文献書誌] F.aosai,H-S.Mun.T-H.Yang,K.Norose,H.Hata,M.Kobayashi,M.Chen,S.Saito,N.Rikihisa,M.Ichinose,A.Yano.: "HSC70-mediated antigen presentation and ex-vivo gene vaccination with SAG1 to Toxoplasma gondii-infection.〔COPA 〔X-9th International Congress of Parasitology,ed.Isao Tada,Somei Kojima,Moriyasu Tsuji." Blogna,Italy.Monduzzi Editore., 7 (1998)