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赤痢アメーバのシスト形成モデルとして重要なEntamoeba invadensの無菌シスト形成系について、その再現性をまず検討した。その結果、シスト形成培養液として47%LGを用いた場合、再現性、シスト形成率ともに良好で、以後この系を用いて実験を行った。(1)アフィディコリンによるシスト形成の抑制:アフィディコリンは核中DNAポリメラーゼの抑制剤として知られており、またこの抑制剤で処理された細胞はDNA合成のS期に入れなくなり、S期とGl期の境界に集積することが高等動物細胞において明らかになっている。このアフィディコリンが栄養型の増殖のみならず、シスト形成も抑制することが明らかになった。この効果は可逆的であり、アフィディコリンを除くことにより増殖およびシスト形成ともに回復した。アフィディコリンで前処理した栄養型をアフィディコリン存在下でシスト形成させたところ、前処理をしていない栄養型に比し、より強く抑制を受け、シストはほとんど形成されなかった。この結果から、シスト形成の開始前にDNA合成が必要であることが明らかになった。(2)シスト形成過程におけるDNAポリメラーゼ活性:栄養型からシストへの変化にともない細胞分裂は停止するが、シストの成熟過程で2回の核分裂が起こることが知られている。そこで、シスト形成過程におけるDNAポリメラーゼ活性の変動を調べた。培養1-4日後にシストを調製し、その抽出液中のDNAポリメラーゼ活性を測定した。その結果、栄養型に比し、培養2日後で25%、4日後で70%の活性の低下が認められた。シストの成熟過程における核分裂はDNA合成をともなわないという報告があることから、今回の結果はこの報告と相関することが示唆された。
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