| 研究概要 |
サイトメガロウイルス(CMV)は胎生期に感染によって脳障害の生ずる最も頻度の高い病原微生物である。私達はマウスCMV(MCMV)を胎生期のマウス脳に感染させて生後における脳障害を組織学的に解析する実験モデルを作成した。このモデルにおいて、MCMVの感染によって新生マウス脳にアポトーシスが誘導されることを明らかにした。アポトーシスが誘導される細胞は、神経細胞、グリア系細胞は数パーセントと少なく、ミクログリアに多かったが、これはミクログリアがアポトーシスに陥っているというより、アポトーシスに陥った細胞を貪食している可能性が高かった。MCMV感染によって神経細胞が脱落、消失しやすいことから神経細胞にアポトーシスが誘導される可能性が高い。TUNEL法と免疫染色の二重染色によりウイルス感染細胞がアポトーシスに陥る可能性少ないことより、神経細胞死はMCMV感染による間接的作用と考えた。初代培養神経細胞にグルタミン酸添加または、血清除去法でアポトーシスを誘導する系にMCMVを感染させるとアポトーシスが抑制される傾向を示した。CMVによる神経細胞のアポトーシスの誘導はサイトカインなどによる間接作用の可能性がある。この点に関しては大脳スライス培養にMCMV感染させ各種サイトカインを添加する実験系で解析している。
CMVの前初期(IE)遺伝子発現がアポトーシスの誘導を抑制するという論文があり、MCMVのどの遺伝子がアポトーシスを促進あるいは抑制するかを知るためにマウス神経芽細胞培養株(N18TG2)にIE遺伝子および早期遺伝子を導入したトランスフォーマント(変異株)を作成した。これらのアポトーシスの誘導はIE発現株では促進されたが、早期抗原発現株では変わらなかった。さらにIEのうち、ie1,ie2,ie3の3種類の遺伝子を導入した変異株を作って検討している。
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