| 研究課題/領域番号 |
10670290
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| 研究機関 | 大阪市立大学 |
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研究代表者 |
綾田 稔 大阪市立大学, 医学部, 助手 (90222702)
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| 研究分担者 |
駒瀬 勝啓 北里研究所, 基礎研究所ウイルス2室, 主任研究員 (80215384)
小倉 壽 大阪市立大学, 医学部, 教授 (10115222)
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| キーワード | 亜急性硬化性全脳炎 / SSPEウイルス / 変異 |
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| 研究概要 |
SSPEウイルスの神経病原性に関与するウイルス側の因子を明らかにするための遺伝子解析の一端として、SSPEウイルス大阪1株、2株、3株について、P遺伝子とM遺伝子の境界領域(P-M領域)をRT-PCR法により増幅し、その塩基配列を決定した。その結果、M遺伝子の転写に異常が認められた大阪1株および大阪2株(B95a分離株)では、P遺伝子の末端が麻疹ウイルスの配列と異なることが明らかになった。即ち、麻疹ウイルスのP遺伝子の末端(ポリAシグナルに相当する)は6個のU(ゲノムセンス)からなるのに対して、大阪1株ではそれより1個少なく5個のUに変異していた。一方、大阪2株のB95a分離株では6個のUのうちのひとつがcに変異していた。今後これらの変異が実際にP遺伝子の転写終結、M遺伝子の転写開始に重要な変異であることをミニゲノムの発現系を利用して証明するため、麻疹ウイルスゲノムのリーダーおよびトレイラー配列を持ち、2種のレポーター遺伝子間に標準型および変異型のP-M領域を挿入したプラスミドを構築した。
また、SSPEウイルス大阪1株、2株、3株について、F遺伝子の塩基配列を決定した。従来指摘されてきたF蛋白C末端の細胞質内ドメイン(35アミノ酸からなり麻疹ウイルスではよく保存されている)の高度な変異が3株全てに認められた。ただしその変異は同一ではなく、大阪1株では35アミノ酸(29アミノ酸は終止コドンの変異による伸長)の変異が、大阪2株では終止コドンは保存されているものの5アミノ酸の変異が、大阪3株では7アミノ酸(5アミノ酸は短縮)の変異が認められた。これらの変異はF蛋白の高次構造の変化、機能的な変化をもたらすと予想される。現在それぞれの株のFおよびH遺伝子を発現できるクローンを選択しており、HおよびF蛋白の相互作用、即ち細胞のレセプターとの結合性や細胞融合能を検討する予定である。
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