| 研究課題/領域番号 |
10670290
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| 研究機関 | 大阪市立大学 |
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研究代表者 |
綾田 稔 大阪市立大学, 医学部, 助手 (90222702)
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| 研究分担者 |
駒瀬 勝啓 北里研究所, 生物製剤研究所・開発研究部門, 主任研究員 (80215384)
小倉 壽 大阪市立大学, 医学部, 教授 (10115222)
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| キーワード | 亜急性硬化性全脳炎 / SSPEウイルス / 変異 / 塩基配列 / 転写 |
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| 研究概要 |
私たちは、SSPEウイルスの神経病原性に関与するウイルス側の因子を明らかにするために、SSPEウイルス大阪1株、2株、3株の遺伝子解析を行っている。P遺伝子とM遺伝子の境界領域を検討したところ、この領域でread-throughが生じる株には変異が認められること、即ち、P遺伝子の末端がUUUUUU(ゲノムセンス)であるべきところが、1塩基少ないUUUUU(大阪1株)、あるいはUUUCUU(大阪2株のうち、B95a分離株)に変化していることが明らかになった。これらの変異が実際にP遺伝子の転写終結、M遺伝子の転写開始に重要な変異であることを直接証明するため、2種のレポーター遺伝子間に標準型および変異型のP-M領域を挿入した麻疹ウイルスのミニゲノムを構築した。ミニゲノムの発現実験(ルシフェラーゼアッセイ)で、確かにこれらの変異がP-M領域でのread-throughに関与していることが示された。また、F遺伝子の塩基配列を解析した結果、3つのSSPEウイルス株全てに、F蛋白の細胞質内ドメインに重大な変異が生じていることが明らかになった。さらに、それぞれの株のFおよびH遺伝子をクローン化して、細胞で発現させた。H蛋白の変異と麻疹ウイルスレセプターCD46との結合性をサル赤血球吸着能の有無で検討した結果、SSPEウイルスのH蛋白は、本来の麻疹ウイルスのH蛋白の性質を維持していること、CD46との結合性獲得にH蛋白の特定のアミノ酸変異が関与することを明らかにした。また、FおよびH蛋白の相互作用、即ち細胞融合能を発現プラスミドを用いて予備的に検討した結果、ウイルスの感染で認められる結果が再現され、今後蛋白レベルで詳細に解析することが可能となった。これらの結果は、SSPEウイルスが使用するレセプターを同定する際にも有用な情報を提供すると考えられる。
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