1999 年度実績報告書

CAT遺伝子導入マウスを用いた病的自己抗体産生機序の解析

研究課題

研究課題/領域番号	10670310
研究機関	順天堂大学
研究代表者	広瀬幸子順天堂大学, 医学部, 助教授 (00127127)
研究分担者	張丹青順天堂大学, 医学部, 助手
キーワード	全身性エリテマトーデス / IgG抗DNA抗体 / 自然抗体 / 自己抗体 / 抗体可変領域遺伝子 / 体細胞突然変異 / 親和性成熟 / CAT遺伝子
研究概要	全身性エリテマトーデス(SLE)においては、自己抗体の産生が病態形成に深く関わっている。SLEに見られる代表的自己抗体である抗DNA抗体についてのハイブリドーマ株の樹立や抗体可変領域遺伝子の解析から、自己抗体が病原性を獲得する過程で起こる重要な変化は、抗体のIgMからIgGへのクラス転換、抗体可変領域遺伝子の体細胞突然変異とこれに伴う親和性成熟、高親和性クローンの選択ならびにクローン性増殖であることが明らかとなっている。重要な問題は、病原性を獲得する以前の低親和性IgMクラス自己抗体は、本来正常個体に存在する、自己の老廃細胞処理に働いている自然抗体と性質が同じであるにもかかわらず、この抗体がSLE患者においてのみ可変領域体細胞突然変異をともう病的自己抗体に変換するのは何故かという点である。本研究ではこの点を解析するため、抗体重鎖のプロモーターとイントロンエンハンサーの間にchloramphenicol acetyl transferase(CAT)遺伝子を繋いだ遺伝子を導入したSLE自然発症New Zealandマウス系の樹立を行い、CAT遺伝子の変異を指標として、抗DNA抗体の可変領域遺伝子の体細胞突然変異の機構を探ることを目的とした。 CAT遺伝子導入C57BL/6マウスをNZBおよびNZWマウスと交配し、CAT遺伝子の存在を目安に各々NZBおよびNZWに8代退交配し、このCAT導入NZBとNZWを交配したF1マウスを作製した。このF1マウスには高度のループス腎炎の発症を伴う高力価のIgG抗DNA抗体産生が認められたので、本年度はSLEを発症したCAT導入F1マウスから抗DNA抗体産生ハイブリドーマ株を樹立した。現在、抗体可変領域遺伝子の体細胞突然変異の有無とCAT遺伝子変異の有無との相関を検討中である。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Jiang, Y. et al.: "Genetically determined aberrant down-regulation of Fc γRIIB1 in germinal center B cells associated with hyper-IgG and IgG autoantibodies in murine SLE."Int, Immunol.. 11. 1685-1691 (1999)
[文献書誌] Hirose, S. et al.: "Down-regulation of Fc γRIIB1 in activated B cells predisposes to hyper-IgG in murine systemic lupus erythematosus."Scan. J. Immunol.. 50. 99-99 (1999)
[文献書誌] Shirai, J. et al.: "Genetic polymorphism of murine tissue plaminogen activator associated with antiphospholipid syndrome."Genes and Immunity. 1. 130-136 (1999)
[文献書誌] Ochiai, K. et al.: "Genetic regulation of anti-erythrocyte autoantibodies and splenomegaly in autoimmune hemolytic anemia-prone New Zealand Black mice."Int. Immunol.. 12. 1-8 (2000)
[文献書誌] Jiang, Y., et al.: "Polymorphisms in IgG Fc receptor IIB regulatory regions associated with autoimmune susceptibility."Immunogenetics. in press (2000)
[文献書誌] Hirose, S. et al.: "Genetic aspects of inherent B-cell abnormalities associated with SLE and B-cell malignancy in New Zealand mouse strains."Int Rev. Immunol.. in press (2000)
[文献書誌] Hamano, Y & Hirose, S.: "Micrasatellite method. In Laboratory Techniques in Renal Cell and Molecular Biology."KARGER. 6 (2000)

1999 年度 実績報告書

CAT遺伝子導入マウスを用いた病的自己抗体産生機序の解析

研究代表者

広瀬 幸子 順天堂大学, 医学部, 助教授 (00127127)

研究成果

[文献書誌] Jiang, Y. et al.: "Genetically determined aberrant down-regulation of Fc γRIIB1 in germinal center B cells associated with hyper-IgG and IgG autoantibodies in murine SLE."Int, Immunol.. 11. 1685-1691 (1999)

[文献書誌] Hirose, S. et al.: "Down-regulation of Fc γRIIB1 in activated B cells predisposes to hyper-IgG in murine systemic lupus erythematosus."Scan. J. Immunol.. 50. 99-99 (1999)

[文献書誌] Shirai, J. et al.: "Genetic polymorphism of murine tissue plaminogen activator associated with antiphospholipid syndrome."Genes and Immunity. 1. 130-136 (1999)

[文献書誌] Ochiai, K. et al.: "Genetic regulation of anti-erythrocyte autoantibodies and splenomegaly in autoimmune hemolytic anemia-prone New Zealand Black mice."Int. Immunol.. 12. 1-8 (2000)

[文献書誌] Jiang, Y., et al.: "Polymorphisms in IgG Fc receptor IIB regulatory regions associated with autoimmune susceptibility."Immunogenetics. in press (2000)

[文献書誌] Hirose, S. et al.: "Genetic aspects of inherent B-cell abnormalities associated with SLE and B-cell malignancy in New Zealand mouse strains."Int Rev. Immunol.. in press (2000)

[文献書誌] Hamano, Y & Hirose, S.: "Micrasatellite method. In Laboratory Techniques in Renal Cell and Molecular Biology."KARGER. 6 (2000)

1999 年度実績報告書

広瀬幸子順天堂大学, 医学部, 助教授 (00127127)