動脈硬化性疾患進展における酸化ストレスの関与の検討とその制御法の開発

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10670410
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 福永 恵 大阪大学, 医学部, 助手 (40283775)
• 研究分担者: 折田 義正 大阪大学, 医学部, 教授 (70028398) ; 堀尾 勝 大阪大学, 医学部, 助教授 (20273633)
• キーワード: isoprostane / 酸化ストレス / 動脈硬化 / 細胞内情報伝達機構 / 遺伝子導入 / 心筋梗塞 / PTCA / Reperfusioninjury

研究概要

1) 遺伝子導入の至適条件を検討するため、ラット培養メサンギウム細胞(MC)にlipofectin法、electroporation法でGreen Fluorescent Proteinのplasmidを遺伝子導入し、electroporation法、960μF、200Vで最大導入効率2.5%を得た。
2) ラット培養血管平滑筋細胞における8-iso-prostaglandjn F_<2α>(8-iso-PGF_<2α>)によるProtein kinaseC(PKC)の活性化機構を検討するために、ウエスタンブロット法を用いたPKC isozymeの細胞内translocation検出の至適条件を検討した。
3) Enzyme immunoassayで測定した、過酸化水素によるMCからのFree及びTotalの8-iso-PGFの産生が時間・濃度依存性に増加し、その増加はシクロオキゲナ-ゼ阻害薬であるインドメサシンやデキサメサゾンで阻害されず、抗酸化作用を有するbutylated hydroxytoluene、ビタミンE、セサミン等で抑制される事を見いだし、MCからの8-iso-PGF_<2α>の産生の検討が薬物の抗酸化作用評価の良好な指標となることを明らかにした。
4) 左冠動脈前下行枝近位部閉塞による急性心筋梗塞の治療目的でdirect PTCAを施行された患者(17名)の冠動脈還流血中のFree 8-iso-PGF_<2α>はPTCA直後に急増し、以後漸減した。この増加は心筋梗塞発症からPTCA施行迄の時間が長いほど遷延した。また、自発的冠動脈再開通を認めた症例ではこの増加の程度が少なく、Free 8-iso-PGF_<2α>が酸化ストレスを介したreperfusion injuryに関与している可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Fukunaga,M.: "Regulation of MAP-kinaseactivation by 8-iso-prostaglandinF_2 in cultured rataortic smooth muscle cells." Recent A dvancesin Prostaglandin,Thromboxane.and Leukotriene Research. 193-196 (1998)
• [文献書誌] Moriyama,T: "increasedoxidativeproducts,n-(carboxymethyl)lysine and 8-isoprostaglandinF_2 in the kidneys of mice with unilateral ureteralobstruction" J.Am.Soc.Nephrol. 9. 504 (1998)
• [文献書誌] Yasuda,T.: "Generation of 8-iso-prostaglandinF_2 from acuteinfarction heart after coronary balloon angioplasty." 2nd International Congresson Coronary Artery Disease抄録集. (1998)
• [文献書誌] Kijima,Y.: "Generation of 8-iso-prostaglandinF_2 from acuteinfarction heart aftercoronary halloon angioplasty" シンポジウム"Potassium Channelsin Cardiovascular Discascsand Cardioprotection"抄録集. (1998)
• [文献書誌] 橋村一彦: "急性心筋梗塞に対するdirectPTCA後の8-iso-prostaglandinF_2生成" 日循誌. 62巻(Suppl.1). 473 (1998)