| 研究概要 |
1. 抗炎症剤グリチルリチン(GL)結合性protein(gbP)の分離精製
GL-affinityカラムを作製し,HIV-1の構成proteinおよびそのリコンビナント(RT,proteaseやRevなど)を結合性polypeptide(gbP)として精製した.
2. gbPのCK-IIによるリン酸化とその生理的意味
HIV-1の遺伝子産物であるRT,proteaseやRevなどは,CK-IIによるリン酸化サイトを複数持っている.そこで,CK-IIによるRT,ProteaseやRevなどのリン酸化とその生理的意味をinvitroで解析した.その結果,CK-IIによってリン酸化されたRTとproteaseは,その酵素活性が有意に活性化されることが明らかになった.
3. 抗HIV-1作用を持つ天然化合物によるCK-II活性阻害
CK-IIによるRTとproteaseの活性化を選択的に阻害する天然抗HIV-1剤を検索した.
その結果,このCK-IIを介するRTの活性化は,quercetin,isoflavone誘導体,glycyrrhetinic酸誘導体(oGA)やNCS-chromophoreによって低濃度で阻害された.しかもこれらの濃度では,RT活性に何ら影響を与えなかった.この結果から,これらの天然化合物はCK-IIを選択的に阻害することによってHIV-1を阻害すると結論された.
4. 炎症性mediatorに対するGLの作用
GL-affinityカラムを用いた上述の方法で,炎症性関連因子(酵素類)を分離精製した.その結果,sPLA2,5'-lypoxygenase(5'-LOX)やcyclooxygenase(COX)などがgbpとして分離精製された.これらのgbPは HIV-1proteinと同様にCK-IIによりリン酸化されて,活性化された.さらに,CK-IIの選択的阻害剤(oGA,quercetinやNCS-chromophore)によって阻害された.従って,GLの抗炎症作用は,CK-IIを介するgbPの活性化を選択的阻害によると結論された.
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