がんで過剰発現するアンキリンリピート蛋白ガンキリンの機能解析と遺伝子治療への応用

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10670467
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 東辻 宏明 京都大学, 医学研究科, 助手 (60281094)
• 研究分担者: 藤田 潤 京都大学, 医学研究科, 教授 (50173430)
• キーワード: 肝がん / アンキリンリピート / 蛋白-蛋白相互作用 / がん抑制遺伝子RB / 転写因子NFkB / オンコジーン

研究概要

1. 転写レベルでヒト肝がん、腎がんにおいて発現が変動している遺伝子の中に、予後、悪性度のマーカーがないかと考え、cDNAサブトラクションその他の方法で正常部に比べ、がん部で発現の増加した42種、低下した10種の遺伝子を得、発現レベルと予後、悪性度との相関がないかを解析した。肝がんではkan-1、VEGF、basicFGF、p21、MT-MMP1が、腎かんではaquaporinl、carbonic anhydraseIVが予後、悪性度と相関するという結果を得た。
2. ヒト肝がんサンプルを用いたcDNAサブトラクションにより、肝がん、その他の消化器系のがん、種々のかん細胞株で過剰発現した未知の遺伝子を得、ヒ卜、マウス、ラットの全長クローニングの結果、主にアンキリンリピートより構成された遺伝子であることがわかり、ガンキリンと名付けた。
3. 機能解析により、ガンキリンは、1)オンコジーンである、2)細胞増殖、細胞周期関連遺伝子である、3)抗アポトーシス作用をもつ、4)核での局在が細胞周期依存的に変動することが明らかになった。
4. アンチセンスガンキリン(S-オリゴとレトロウイルスベクターによる)によりがん細胞での過剰発現を抑制したところ、増殖、悪性形質転換能の低下、アポトーシスの誘導をみた。
5. ガンキリンは、がん抑制遺伝子であるFRBと転写因子であるNFkappaBと複合体をつくることが明らかになった。

研究成果

• [文献書誌] Harada T,et al.: "Membrane-type matrix metallopretermse-1(MT-MMP-1)gene is onerexpessed in highly in invasine hepatocellular carcinoma." J.Hepatol. 28(2). 231-239 (1998)
• [文献書誌] Takanawa J,et al.: "Transcript lelels of aquapovinl and carbonic anlydrase IV as predictine indicatirs for prognosis of venal cell carcinoma patiants" Int J Cancer. 79(1). 1-7 (1998)
• [文献書誌] Nishiyama H,et al: "Cloning and characterization of human CIRPC coldindueible K NA-binding protein) cDNA and chromosomal resignment of the gene." Gene. 204(1〜2). 115-120 (1997)
• [文献書誌] Danno S,et al.: "Increased transcript level of RBn3,a member of the glycine-rich RNA-binding protein femily,in human cells in response to cold stress." Biochem Biophys Res Commum. 236(3). 804-807 (1997)
• [文献書誌] Kaneko Y,et al.: "A novel hsp t10-velated gene,apg-1,that is a bundonthy expressel in the to stis nesponds to a lowe tenperatne heat shock vatha than the fraditional elevated tempretures" J Biol Chem. 272(5). 2640-2645 (1997)
• [文献書誌] Furutani M,et al.: "Decveased expression and rave sonaticnmtation of the CIP1/WAF1 gene in human hepatocellular carcinoma" Cancer Lett.111. 191-197 (1997)