胃癌、大腸癌におけるアポト-シス制御因子bcl-xL、bak発現異常の機序解明

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10670470
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 金山 周次 大阪大学, 医学部, 助手 (40185913)
• 研究分担者: 宮崎 義司 大阪大学, 医学部, 助手 (30303960) ; 篠村 恭久 大阪大学, 医学部, 助教授 (90162619)
• キーワード: 胃癌 / 大腸癌 / アポト-シス / bcl-xL / bak / astat3 / IRF-1

研究概要

胃癌・大腸癌におけるアポト-シス耐性の原因となっているbcl-xLの過剰発現,bakの発現抑制の機序を明らかにするため、本年度は転写因子IRF-1とbcl-xL,bakのmRNA量の関連、ras/EGFR/Stat3系によるbcl-xLの発現調節につき検討した。
1. 転写因子IRF-1とbcl-xLのmRNA量の関連
内視鏡下生検により得られた大腸癌組織と周辺正常組織よりRNAを抽出し、競合的PCRでIRF-1とbcl-xL,bakのmRNAを定量した。周辺正常組織と比較して約半数の大腸癌組織において、IRF-1遺伝子の発現が低下しており、IRF-1とbcl-xLの遺伝子発現の間に負の相関、IRF-1とbakの遺伝子発現の間に正の相関が認められ、IRF-1がbcl-xL,bakの遺伝子発現を調節している可能性が示唆された。
2. ras/EGFR/Stat3系によるbcl-xLの発現調節
rasの遺伝子異常がEGF family growth factorのautocrine loopを介してBcl-xl発現を調節しているか活性化ras遺伝子を導入した腸粘膜上皮細胞を用い検討した。この細胞では転写因子Stat3の著明な恒常的活性化がみられ、Bcl-xLの増加、アポト-シス抵抗性が観察された。この細胞にdominant negative stat3導入による抑制実験を行いstat3の関与を調べたところ、dominant negative stat3導入によりbcl-xL mRNA量、蛋白量の減少と共にアポト-シス感受性が回復し、rasの遺伝子異常はStat3の著明な恒常的活性化、bcl-xLの誘導を介してアポト-シス耐性に働くことが明らかとなった。

研究成果

• [文献書誌] Kondo S.et al: "Modukation of apoptosis by endogenons Bcl-xL.expression in MKN-45 human gastric cancer cells." Oncogene. 17. 2585-2591 (1998)
• [文献書誌] Zushi S.et al: "Stat 3 mediates the survival signal in oncogenic ros-transfected intestinal epithelial cells." Int J Cancer. 78. 326-330 (1998)
• [文献書誌] Nakahara M.et al: "Anovel gain-of-function mutation of c-kit gene in gastrointestinal stromal tanor." Gastroenterology. 115. 1090-1095 (1998)
• [文献書誌] Ueyama H.et al: "High Fas ligand expression on tymphocytes in lesions of ulcecative colitis." Gut. 43. 48-55 (1998)