肺癌の抗KL-6/MUC1マルチモノクローナル抗体補充療法による治療の試み

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10670548
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 河野 修興 愛媛大学, 医学部・附属病院, 講師 (80215194)
• 研究分担者: 横山 彰仁 愛媛大学, 医学部, 助手 (30191513)
• キーワード: 肺癌 / KL-6 / MUC1 / マウスモノクローナル抗体 / CAIMAN / ヒトモノクローナル抗体 / キメラ抗体 / 抗体補充療法

研究概要

MUC1は、多くの固形癌細胞に非常に長い膜貫通型糖蛋白質として発現し、細胞接着を物理空間的に阻害する作用を有している。私達は、抗KL-6/MUC1マウスモノクローナル抗体が、細胞接着を誘導するcell adhesion Inducing monoclonal antibody(CAIMAN)であり、腫瘍増殖を抑制することを明らかにしてきた。これらの知見は、抗KL-6/MUC1抗体の補充療法が、癌の免疫療法として有効である可能性を示している。
一方、ヒトへのモノクローナル抗体の臨床応用に関しては、免疫原性の問題、ヒト体内でのマウス抗体の生物活性低下、代謝が速い等の問題があり、マウス・ヒトキメラ抗体やCDR-grafted (humanized)antibodyの作製等が試みられている。
本年度は、抗KL-6/MUC1抗体の可変領域のcDNA(Vн及びVκ遺伝子)のクローニング及び遺伝子配列の解析、更には、マウス・ヒトキメラ抗体を作製することが目的であった。
免疫グロブリン非分泌型マウス骨髄腫細胞株P3/NS1/1-Ag4-1(NS1)由来のKL-6抗体産生ハイブリドーマ細胞株からRNAを抽出し、Mouse Ig-Primer set(Novagen社)を用いRT-PCR法によりKL-6抗体の可変領域cDNAをクローニングし、遺伝子配列を解析した。各々2種類のVн及びVκ遺伝子がクローニングされたが、1種類はNS1のVн及びVκ遺伝子配列と一致した。現在は、クローニングしたKL-6抗体のVн及びVκ遺伝子を、プロモーターとヒト定常領域遺伝子が既に組み込まれた発現ベクターにそれぞれ組み込み、細胞に導入し、抗KL-6/MUC1マウス・ヒトキメラ抗体を作成中である。今後は、安定型キメラ抗体産生形質転換細胞の樹立及びキメラ抗体の精製、更にはKL-6/MUC1高発現腫瘍細胞に対する反応等について検討する予定である。

研究成果

• [文献書誌] Oyama T., et al.: "High Serum KL-6 Levels Predict the Deterioration of Pulmonary Function in Patients with Rheumatoid Arthritis"Japanese Journal of Rheumatology. 9. 373-380 (1999)
• [文献書誌] Bandoh S., et al.: "Sequential Changes of KL-6 in Sera of Patients With Interstitial Pneumonia Associated With Polymyositis/Dermatomyositis"Annals of the Rheumatic Disease. 59. 257-262 (2000)
• [文献書誌] Hirota Y., et al: "pS2 Expression as a Possible Diagnostic Marker of Colorectal Carcinoma in Ulcerative Colitis"Oncology Reports. 7. 233-239 (2000)
• [文献書誌] Kimura T., et al.: "Clinical Significance of MUC1 and E-Cadherin Expression, Cellular Proliferation and Angiogenesis at the Deepest Invasive Portion of Colorectal Cancer."International Journal of Oncology. 16. 55-64 (2000)
• [文献書誌] Hamada H., et al.: "A Novel Monoclonal Antibody, H9, Directed Against the Core Protein of MUC1 Mucin"Oncology Reports. 7. 225-232 (2000)
• [文献書誌] Hirasawa Y., et al: "Natural Autoantibody to MUC1 Is a Prognostic Indicator for Non-Small Cell Lung Cancer"American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 161. 589-594 (2000)