| 研究課題/領域番号 |
10670743
|
|---|
| 研究機関 | 福島県立医科大学 |
|---|
研究代表者 |
鈴木 仁 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (80045682)
|
|---|
| 研究分担者 |
鈴木 重雄 福島県立医科大学, 医学部, 助手 (00274960)
鈴木 順造 福島県立医科大学, 医学部, 助教授 (20171217)
|
|---|
| キーワード | コクサッキーウイルス / ウイルス性腎炎 / CAR / アデノウイルス / ウイルスレセプター |
|---|
| 研究概要 |
最近、コクサッキーウイルスとアデノウィルス共通のレセプター(common coxsakievirus and adenvirus receptor:CAR)が細胞膜に存在し、細胞とウイルスの結合及び細胞内移行に関係していることが示されている。また、CARがヒトのメサンギウム細胞にも発現していることが明らかになっている。そこで私達は、マウス正常腎及び私達が作成したコクサッキーB群ウイルスによる腎炎モデルにおいてCARが腎糸球体のどの部位に発現し、どのように発現が変化しているかを検討し、ウイルス感染と腎障害のメカニズムについて明らかにすべく研究を続けている。実際にはマウス正常腎からCAR遺伝子をRT-PCR法によりクローニングし、この遺伝子からcRNAプローブを得て、私達が作成したウイルス腎炎モデルの腎臓からRNAを抽出、腎炎の経過及び正常腎と比較してCARのmRNA発現がどのように変化しているかをRNase Protection Assayにより解析する。またin situ hybridization法によりCARが腎糸球体のどの部位に発現しているかを検討する。現在のところ、マウス正常腎からRNAを抽出して、CARに対するプライマーを用いRT-PCR法によりCARの遺伝子をクローニングいているところである。これを任意のプラスミドベクターにサブクローニングしプラスミドを大量調整し、これを鋳型としてin-vitro transcriptionによりCARのcRNAプローブを作成できることを確認する予定である。同時に、コクサッキーB4ウイルスによる腎炎モデルも作成し腎組織を得て、RNAも抽出している。今後は、RNase Protection Assayやin situ hybridization法により発現変化及びその局在について検討していく予定である。
|
