内因性肺動脈平滑筋細胞エラスターゼの分子生物学的同定に関する研究。

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10670754
• 研究機関: 埼玉医科大学
• 研究代表者: 小林 順 埼玉医科大学, 医学部, 講師 (20153611)
• 研究分担者: 薗田 勝 共丘女子大学, 家政学部・栄養学科, 助教授 (90112648)
• キーワード: エラスターゼ / 肺高血圧症 / 肺動脈 / 平滑筋細胞 / PCR / セリンプロテアーゼ

研究概要

平成12年度は、初年度(平成10年度)で使用したプライマーによるpolymerase chain reaction(PCR)の検討を行った。しかし度重なるブタ肺動脈平滑筋細胞の感染が起こり、実験が難渋した。平成11年度で得られたPCR products(476bp)は、遺伝子検索の結果、mouse Tリンパ球由来のセリンプロテアーゼの一部と59%のDNA配列のhomologyが認められたため、ようやく本年度後半よりスクリーニングに取りかかった。スクリーニングはplate lysate法を用いて、mBNA libraryをベクターで増幅し感染させた大腸菌より、PCR product probeで拾い上げる作業を開始したが、今のところ陽性なものは見つかっていない。このスクリーニングと平行して、ブタ肺動脈平滑筋細胞よりのtotal mRNAを使って、今回のprimerによるNorthern blottingも施行して、probeとしての有用性も確認することができた。

研究成果

• [文献書誌] 小林順,薗田勝: "肺動脈選択的一酸化窒素供与体による実験的肺高血圧症治療への応用"母子健康協会第11回医学助成研究報告書. 23-25 (2000)
• [文献書誌] 薗田勝,小林順 他: "経静脈的投子S-ニトロソグルタチオンの血中動態"磁気共鳴と医学. 11巻. 99-102 (2000)
• [文献書誌] Fumiaki,Kotake,Jun Kobayashi et al.: "Nitric oxide-related compounds in patients with congenital heart defects and pulmonary hypertension"Pediatrics International. Vol.42,(2). 249-254 (2000)
• [文献書誌] 先崎秀明,小林順 他: "小児用下大静脈閉塞バルンカテーテルの作製と使用経験"日本小児循環器学会雑誌. Vol.16(4). 650-653 (2000)
• [文献書誌] Mio Nogaki,Jun Kobayashi et al: "Ventricular energetics in Fontan circulation ; Evaluation with a theoretical model"Pediatrics International. Vol.42(5). 651-657 (2000)