| 研究課題/領域番号 |
10670914
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
精神神経科学
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| 研究機関 | 埼玉医科大学 |
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研究代表者 |
池田 正明 埼玉医科大学, 医学部, 講師 (80232198)
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| 研究分担者 |
本間 さと 北海道大学, 医学部, 助教授 (20142713)
折茂 彰 埼玉医科大学, 医学部, 講師 (70275866)
吉村 和法 埼玉医科大学, 医学部, 助手 (20158497)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 2000
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| キーワード | 生体リズム / BMAL1 / 時計遺伝子 / 視交叉上核 / 睡眠覚醒リズム障害 / BMAL2 / 遺伝子解析 / 転写因子 |
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| 研究概要 |
1.ヒトBMAL1 BACクローンの塩基配列を解析し、17のエクソンからなること、複数のBMAL1のパリアントはスプライシングの違いから生成されることを明らかにした。
2.マウスBMAL1BACクローンの翻訳領域全塩基配列を解析し、17のエクソンからなること,翻訳領域はBMAL1ゲノムの約30kbにわたっていることを明らかにした。
3.マウスBMAL1発現に関わる領域を検討するため、翻訳領域上流の約50kbの塩基配列を決定した。その中からBMAL1遺伝子発現に関わる領域を同定した。
4.ブライマーエクステンション法およびRNAプロテクションアッセイにより、マウスBMAL1転写開始点を同定した。
5.睡眠覚醒リズム障害患者におけるBMAL1遺伝子変異を検索するためSSCPによって約70名の疾患群および正常群で、BMAL1遺伝子翻訳領域で変異の有無を解析した。変異の認められたエクソンに関して、さらにPCR産物を直接シークエンスして変異部位を同定した。
6.時計遺伝子変異体の機能を解析する目的で、相互作用を検討するためTwo-hybrid Systemによる実験系を確立した。
7.時計遺伝子変異体の機能を解析する目的で、per遺伝子転写活性化能を検出するルシフェラーゼアッセイ系を確立した。
8.時計遺伝子変異体の機能を解析する目的で、時計遺伝子産物融合蛋白を作成した。
9.新規時計関連遺伝子をクローニングするためスクリーニングを行い、BMAL1に相同性の高い新規遺伝子BMAL2の単離に成功した。
10.新規遺伝子BMAL2の発現、ヒト遺伝子座、細胞内局在などを解析した。
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