抗リン脂質抗体症候群モデル動物を用いた血栓発症機構の解析

1998 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 10670950
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 本田 繁則 大阪大学, 医学部, 助手 (00303959)
• 研究分担者: 冨山 佳昭 大阪大学, 医学部, 助手 (80252667)
• キーワード: APS / β2GPI / annexin V / aPL

研究概要

本研究では、抗リン脂質抗体症候群(以下APS)のモデル動物よりリン脂質に対するモノクローナル抗体を作製しそのエピトープを同定すると共に、血小板や内皮細胞におけるphospholipid(PL)の細胞膜表面への発現機序を明らかにすることで、APSにおける血栓形成機構のメカニズムの一旦を明らかにし、新しい治療法の可能性を検討する事を目的としている。
1) 抗リン脂質抗体のエピトープの決定:
我々は今回の計画でW/BF1マウスより6種類のモノクロナールな抗リン脂質抗体(aPL)を作製した。そのうち数種類がβ2GPIに対する抗体であることが明らかとなった。さらに興味あることにこれらの抗体の内2種類は酸化LDLとも交差反応することが判明した。今後、これら抗体のβ2GPI上のエピトープを決定するために、まず5つのドメインをもつβ2GPIの各部分の欠損させた変異蛋白を作製する予定である。
2) 細胞膜表面へのPS発現機構に関する検討
aPLの血栓形成にはβ2GPIやannexinVなどのphospholipid-binding protein(PBP)が膜上のPL、特にカルジオリピンやphosphatidlserine(PS)と結合することが重要であるが、これらは通常膜の内側に存在しており、アポトーシス時にしか外側へ露出してこない。現在、各種刺激により膜表面上(血小板、内皮細胞)にカルジオリピンやPSがどのように発現されるか、APS患者と正常との間に差がないかどうかを検討中である。

研究成果

• [文献書誌] Honda S,Tomiyama Y,et al: "A two-amino acid insertion in the Cys167loop of the allb subunit is associated with a variant of Glanzmann thrombasthenia:critical role of Asp163 in ligand binding." Journal of Clinical Investigation. 102(6). 1183-1192 (1998)
• [文献書誌] Tadokoro S,Tomiyama Y,Honda S,et al: "A Gln747⇒Pro substitution in the αII♭ subunit is responsible for a moderate αII♭β3 deficiency in Glanzmann thrombasthenia." Blood. 92(8). 2750-2758 (1998)
• [文献書誌] Honda S,Tomiyama Y,et al: "Association between ligand-induced conformational changes of integrin αII♭β3 and αII♭β3 mediated intracellular Ca2+signaling." Blood. 92(10). 3675-3683 (1998)
• [文献書誌] Shiraga M,Tomiyama Y,Honda S,et al: "Involvement of Na^+/Ca^<2+> exchanger in inside-out signaling through the platelet integrin αII♭β3." Blood. 92(10). 3710-3720 (1998)