| 研究課題/領域番号 |
10670955
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
血液内科学
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
陣内 逸郎 長崎大学, 医学部・附属病院, 講師 (70162823)
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| 研究分担者 |
塚崎 邦弘 長崎大学, 医学部, 助手 (40274659)
朝長 万左男 長崎大学, 医学部, 教授 (40100854)
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| 研究期間 (年度) |
1998 – 1999
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| キーワード | ATL / ストローマ細胞 / 長期共培養系 / Cobble stone area / 接着分子 / シグナル伝達 |
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| 研究概要 |
(1)MS-5細胞株との共培養系によるATL細胞株の増殖実験
ATL症例より樹立された細胞株を用いて、MS-5骨髄間質細胞株との共培養系における増殖動態を観察した。多くの細胞株において、MS-5のfeeder layerと接着ないしは潜り込んで、いわゆるcobblestone area(CA)を形成して増殖することが観察された。IL-2依存性細胞株においてもIL-2非存在下では同様の現象を観察した。この接着依存性細胞増殖機構には、接着分子を介したシグナル伝達系の関与が想定されるので、今後これらの同定と異常解析が必要である。
(2)MS-5細胞株との共培養系で増殖するATL細胞におけるHTLV-1ウイルスゲノムおよび遺伝子発現の異常解析
共培養系でCAを形成して増殖するATL細胞における、HTLV-1ウイルスゲノム発現の変化を解析した。CA形成細胞においてtax蛋白およびgag蛋白の発現は、MS-5のfeeder layer非存在下に比較して低下ないしは消失していた(免疫染色)。現在、in situ hybridization法を用いて、tax遺伝子を始めとするウイルスmRNAおよびtax蛋白によって発現や機能に影響を受ける宿主細胞側の遺伝子mRNAの発現を解析中である。本実験系のウイルス遺伝子非発現状態でのATL細胞の増殖機構は、臨床病態のin vitroモデルになりうる。
(3)MS-5細胞株との共培養系で増殖するATL細胞におけるJAK/STATシグナル伝達系の解析
本培養系において増殖するATL細胞株では、ウイルスゲノムの発現が低下ないしは消失していることを受けて、ウイルス非発現状態におけるATL細胞の増殖機構におけるシグナル伝達、特にJAK/STAT系の活性化の変化を免疫沈降法とイムノブロット法等を用いて解析した。その結果、一部の細胞株ではSTAT3のチロシンリン酸化が、MS-5共培養条件下において抑制を受けていることが明らかとなった。接着依存性増殖におけるATL細胞のシグナル伝達異常解析は、臨床病態を反映するものと考えられる。
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