研究概要 |
まず,ラット及びマウスの分泌型のNa-K-2Cl cotransporter(NKCC1)の腎内局在を明らかにした。マウスでは髄質内層集合尿細管(IMCD)に最も発現が強いが,他の部位にも広く発現が認められた。一方,ラットでは髄質外層集合尿細管(OMCD)に最も発現が強く,髄質内層集合尿細管と糸球体にも発現が強くみられたが,他の部位では,ほとんど発現がみられず,マウスと異なり,より局在していることが判明した。次に,ラットのNKCC1について検討した。まず,脱水や慢性代謝性アシドーシスで、集合尿細管でのmRNA及び蛋白発現が増加することがRT-competitive PCR及びWesten blotにて判明した。このNKCC1の発現調節を司る因子を探るため,単離したOMCDを用いて検討した。OMCDをincubationする浸透圧を上げていくと,NKCC1mRNA発現が増加し,890mOsmで最大となり,それ以上の浸透圧では,かえって減少した。次に,尿濃縮の鍵を握る抗利尿ホルモン(ADH)存在下でincubationすると,NKCC1mRNA発現はやはり増加した。Osmotic minipumpを用いて,ラットに大量の,ADHを投与してもNKCC1mRNAの発現は増加した。以上のことより,NKCC1は体液の生理的変化に応じて発現が変化し,浸透圧やADHがその調節因子となっていることが判明した。
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